發(fā)布時間：2025-06-27 23:36

　　 目的探討高鹽誘導單核巨噬細胞極化,以及極化后巨噬細胞對腎臟纖維細胞株(NRK-49F)增殖及表型轉化的影響。方法培養(yǎng)大鼠骨髓單核巨噬細胞及NRK-49F,隨后予以高鹽(Na+161 mmol/L)刺激單核巨噬細胞2 h。采用RT-qPCR檢測M0、M1、M2各型巨噬細胞表面標記物,同時分別收集正常及高鹽組巨噬細胞培養(yǎng)基,予以RT-qPCR及Elisa分別檢測培養(yǎng)基中IL-6及TGF-β的mRNA表達與蛋白表達。隨后建立巨噬細胞與NRK-49F的Transwell小室共培養(yǎng)體系。采用EdU及Transwell分別檢測NRK-49F增殖及遷移能力。予以Western blot檢測NRK-49F中collagen I、collagen III及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)相對表達情況。結果 RT-qPCR結果顯示,與對照組相比,高鹽組細胞中表達M2型巨噬細胞表面標記物甘露糖受體(MR)和精氨酸酶(Arg)基因的mRNA水平顯著升高(P<0.05)。EdU及Transwell結果顯示,共培養(yǎng)體系中,高鹽處理巨噬細胞組上層NRK-49F增殖、遷移能力增強(P<0.05)。West...

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【部分圖文】：

圖1 免疫熒光鑒定M0巨噬細胞表面標記物F4/F80

巨噬細胞經(jīng)原代分離培養(yǎng)后為M0型巨噬細胞，以F4/80作為表面標記行免疫熒光染色，如（圖1）所示，95%以上的細胞均表達F4/80，為綠色熒光，進一步證實培養(yǎng)單核巨噬細胞成功；M1型巨噬細胞由于其具有促進炎的作用，因此高表達炎癥相關基因IL-1β、TNF-α；M2型巨噬細胞具有強....

圖2.巨噬細胞表面標記物MR基因m RNA相對水平

RT-qPCR結果顯示（圖10），高鹽組細胞培養(yǎng)液中IL-6與TGF-βmRNA均顯著高于正常組表達（P<0.05）。Elisa結果顯示（表2），與正常組相比，高鹽組細胞培養(yǎng)液中IL-6與TGF-β1分泌量顯著增高（P<0.05）。圖3巨噬細胞表面標記物Arg基因mRNA....

圖3 巨噬細胞表面標記物Arg基因m RNA相對水平

圖2.巨噬細胞表面標記物MR基因mRNA相對水平3討論

圖4 巨噬細胞表面標記物IL-1β基因m RNA相對水平

高血壓所致的腎臟損傷引起腎臟纖維化的機制十分復雜，包括免疫炎癥反應，氧化應激、神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等[14-15]。其中，在免疫炎癥反應中，巨噬細胞浸潤、極化并分泌多種炎癥介質及細胞因子是導致腎臟纖維化的重要原因[16-17]。研究表明，在患病人群及動物模型的腎小球及腎小管間質中均可見....

本文編號：4054067