發(fā)布時(shí)間：2020-12-08 07:37

　　背景:我國(guó)已逐步進(jìn)入老年社會(huì),骨質(zhì)疏松癥是老年人尤其是中老年婦女的常見(jiàn)病,盡管降鈣素是臨床上用來(lái)治療骨質(zhì)疏松癥的有效藥物,但其也存在著諸如成本高、半衰期較短、免疫原性高等問(wèn)題。因此,發(fā)掘更高效的降鈣素具有重要臨床意義。目的:通過(guò)對(duì)多種新型海洋來(lái)源的降鈣素基因序列進(jìn)行序列對(duì)比、進(jìn)化樹(shù)分析、活性檢測(cè),發(fā)現(xiàn)高效新型降鈣素,為臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ);建立高通量挖掘驗(yàn)證活性多肽的技術(shù)平臺(tái),為發(fā)現(xiàn)新功能多肽提供技術(shù)儲(chǔ)備。內(nèi)容:1、利用生物信息學(xué)方法從海洋生物基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中挖掘不同物種的降鈣素序列。2、分析各降鈣素序列差異、化學(xué)合成、質(zhì)譜分析及活性驗(yàn)證。3、總結(jié)活性規(guī)律,并在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)優(yōu)化新的降鈣素序列及功能驗(yàn)證。4、通過(guò)對(duì)降鈣素的研究初步建立海洋生物活性多肽的篩選平臺(tái)。方法:1、利用鮭魚(yú)降鈣素序列進(jìn)行BLAST獲得其他物種的降鈣素序列,由兩部分組成:NCBI非冗余蛋白庫(kù)和華大基因水生生物基因組數(shù)據(jù)庫(kù)。2、通過(guò)clustal omega軟件進(jìn)行序列比對(duì),結(jié)合物種選取具有代表性的序列使用MEGA7軟件構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。3、根據(jù)進(jìn)化樹(shù)結(jié)果,結(jié)合物種分類(lèi)選擇包括鮭魚(yú)降鈣素在內(nèi)的13條序列進(jìn)行化學(xué)合成。4、按照中國(guó)藥... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：98 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鮭魚(yú)降鈣素的空間3D結(jié)構(gòu)

MEGA7 軟件構(gòu)建的降鈣素進(jìn)化樹(shù)。進(jìn)化樹(shù)使用鄰接法和最大別構(gòu)建，然后生成一個(gè)共識(shí)樹(shù)。進(jìn)化距離使用 JTT 矩陣法計(jì)算代表遺傳距離Evolutionary relationships of calcitonins. Phylogenetic analysis waA7 software using the Neighbor-Joining method and Maximum Lhe evolutionary distances were computed using the JTT matrix-basular evolutionary tree of the calcitonin peptides was also drawn by are. The numbers at internal nodes and branches indicate the percentstrap values (1000 replicates). Scale length represented genetic dis樹(shù)結(jié)果顯示，根據(jù)距離關(guān)系和物種，我們可以將這 27 條序列分二組和第五組中各選擇 3 條序列，從第一組和第三組中各選擇中選擇 1 條序列，再加上人降鈣素和鮭魚(yú)降鈣素共計(jì) 13 條用于性檢測(cè)。序列及物種信息見(jiàn)表 5。

Gga的MS/HPLC結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]海洋動(dòng)物活性多肽和多糖的研究進(jìn)展[J]. 孟春英,王茂劍,張健,王共明,侯志剛.  齊魯漁業(yè). 2015 (05)
[2]對(duì)骨質(zhì)疏松性慢性疼痛:如何認(rèn)知和預(yù)防?[J]. 位新維,陳志信.  中國(guó)組織工程研究. 2014(38)
[3]鮭魚(yú)降鈣素柔性脂質(zhì)體大鼠鼻腔給藥的降血鈣效應(yīng)[J]. 陳銘,鄧秋,李馨儒,劉艷.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2007(06)
[4]蛋白多肽類(lèi)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)研究概況[J]. 樊蓉,張純,高申.  藥學(xué)實(shí)踐雜志. 2006(03)
[5]利用煙草表達(dá)一種新型鮭魚(yú)降鈣素的初步研究[J]. 王曉曄,普穎穎,宋杰,王國(guó)豐,錢(qián)虹妹,林娟,趙凌俠,唐克軒.  揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(01)
[6]聚乙二醇修飾蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的研究現(xiàn)狀及展望[J]. 徐靜.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(預(yù)防、診斷、治療用生物制品分冊(cè)). 2004(02)
[7]鮭魚(yú)降鈣素重組桿狀病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 劉穎,王正坤,梁東春,郭剛,張鏡宇.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2003(01)
[8]美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生院有關(guān)骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防、診斷和治療的共識(shí)文件[J]. 秦嶺,張戈.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2002(02)
[9]人修飾型降鈣素和鼠酰胺化酶基因在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的偶聯(lián)表達(dá)[J]. 楊冠珍,陳珍珍,崔大敷,李伯良,吳祥甫.  生物工程學(xué)報(bào). 2002(01)
[10]鮭魚(yú)降鈣素在鏈霉菌中的分泌表達(dá)[J]. 洪斌,李元,李嗣英,姜蓉.  遺傳學(xué)報(bào). 1998(04)



本文編號(hào)：2904723