發(fā)布時間：2024-06-04 02:35

　　背景:糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的主要并發(fā)癥,并且是慢性腎功能衰竭和終末期腎臟疾病的最普遍原因,然而,該疾病的發(fā)病機理仍不清楚。多研究認(rèn)為,糖尿病時的高血糖癥、氧化應(yīng)激損傷及隨后的慢性炎癥,參與了腎纖維化和腎小球硬化的進程,促進系膜細(xì)胞肥大和基質(zhì)擴張。在此過程中NF-κB信號通路發(fā)揮了促增殖和促炎的關(guān)鍵作用。溴結(jié)構(gòu)域和末端外蛋白家族(Bromodomain and Extra-Terminal domain,BET)成員BRD4通過表觀遺傳學(xué)調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄過程,尤其是在腫瘤和炎癥的進程中,對c-Myc和NF-κB都有重要的調(diào)控作用。特異性抑制BRD4的功能在多種腎臟疾病動物模型的中具有保護作用,BRD4有可能成為調(diào)控DN時系膜細(xì)胞肥大和腎臟纖維化進程的重要治療靶點。目的:本研究通過觀察JQ1對高糖誘導(dǎo)的人腎系膜細(xì)胞HMCs增殖和肥大表型的影響,初步探討B(tài)RD4在高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞肥大機制中的作用。方法與結(jié)果:1.高糖誘導(dǎo)的人腎系膜細(xì)胞HMCs細(xì)胞中BRD4的上調(diào):高糖(30m M)處理HMCs細(xì)胞48小時后,應(yīng)用western blot檢測BR...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第1章 文獻綜述
    1.1 溴結(jié)構(gòu)域蛋白BRD4與腎臟疾病
        1.1.1 溴結(jié)構(gòu)域蛋白BRD4的結(jié)構(gòu)
        1.1.2 BRD4的功能
        1.1.3 BRD4與疾病
        1.1.4 BRD4與腎臟疾病
    1.2 BRD4與核因子NF-κB
        1.2.1 NF-κB的結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 NF-κB在腎臟疾病中的作用
        1.2.3 BRD4與NF-κB
第2章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗設(shè)備
        2.1.3 細(xì)胞株
        2.1.4 藥品保存與稀釋
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 MTT檢測細(xì)胞增殖
        2.2.3 檢測總蛋白/細(xì)胞數(shù)量
        2.2.4 細(xì)胞總蛋白的提取
        2.2.5 BCA法蛋白濃度定量
        2.2.6 蛋白免疫印記(western blot)
        2.2.7 評估細(xì)胞中NF-κB的核易位
    2.3 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 高糖誘導(dǎo)HMCs細(xì)胞中BRD4表達上調(diào)
    3.2 JQ1抑制高糖誘導(dǎo)的人腎系膜細(xì)胞HMCs增殖
    3.3 JQ1可以明顯抑制BRD4的功能,下調(diào)增殖基因表達
    3.4 JQ1抑制高糖誘導(dǎo)的HCMs細(xì)胞肥大表型
    3.5 JQ1下調(diào)高糖誘導(dǎo)的HMCs細(xì)胞合成的膠原Collagen-IV
    3.6 抑制高糖誘導(dǎo)的HMCs中NF-κB的活化
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝



本文編號：3988743