發(fā)布時(shí)間：2024-06-04 03:05

　　目的:通過(guò)觀察單純?nèi)毖?1%O2)和缺氧/饑餓兩種環(huán)境下重組人血管內(nèi)皮抑制素(endostar)及多靶點(diǎn)抗血管生成藥物E109(尚未上市的試驗(yàn)藥物,因涉及商業(yè)保密、以其臨床試驗(yàn)的倫理批號(hào)后四個(gè)字母表示)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)形態(tài)、增殖,成管以及遷移能力之作用;觀察缺氧環(huán)境下兩種藥物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物蛋白水平的影響,并與前期觀察到的缺氧環(huán)境下單靶點(diǎn)抗血管生成藥貝伐單抗(bevacizumab)對(duì)HUVEC的作用結(jié)果對(duì)比,找出三種代表性抗血管生成藥對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞作用的異同之處。方法:選取狀態(tài)良好的對(duì)數(shù)期HUVEC進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用Billups-rothenber細(xì)胞缺氧研究裝置建立缺氧實(shí)驗(yàn)環(huán)境,并在此基礎(chǔ)上以無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞建立缺氧/饑餓環(huán)境。觀察細(xì)胞形態(tài)并拍照,通過(guò)MTT法檢測(cè)環(huán)境及藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響,并根據(jù)MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇后續(xù)遷移及三維培養(yǎng)成管實(shí)驗(yàn)中處理時(shí)間點(diǎn)及藥物濃度。通過(guò)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)、三維培養(yǎng)成管實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)兩種環(huán)境下E109及恩度對(duì)HUVEC遷移、成管能力的影響,...

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2不同環(huán)境處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變注：NC（NormolControl）代表細(xì)胞于正常環(huán)境培養(yǎng)；H（Hypoxia）代表細(xì)胞于

結(jié)果1實(shí)驗(yàn)環(huán)境及藥物處理引起HUVEC形態(tài)學(xué)變化1.1正常、單純?nèi)毖�、單純饑餓及缺氧/饑餓環(huán)境對(duì)HUVEC細(xì)胞形態(tài)的影響使用倒置顯微鏡觀察不同環(huán)境處理后的細(xì)胞，與正常培養(yǎng)環(huán)境相比，單氧環(huán)境、單純饑餓環(huán)境及缺氧/饑餓環(huán)境處理24、48小時(shí)后，部分HUVE出現(xiàn)梭狀改變，并發(fā)....

圖3缺氧+E109處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變注：H+E1代表缺氧+1μmol/LE109處理；H+E4代表缺氧+4μmol/LE109處理；H+E6

在缺氧+E10948小時(shí)組，可見(jiàn)部分細(xì)胞的偽足仍然存在，存活下來(lái)的細(xì)胞胞質(zhì)回縮，發(fā)出偽足的細(xì)胞數(shù)目減少，偽足的長(zhǎng)度也明顯縮短。部分細(xì)胞的偽足甚至出現(xiàn)斷裂。具體如圖3所示。圖3缺氧+E109處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變注：H+E1代表缺氧+1μmol/LE109處理；H+E4代表....

圖4缺氧/饑餓+E109處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變注：H/S+E1、H/S+E4、H/S+E6分別代表缺氧/饑餓環(huán)境下同時(shí)給予1μmol/L、

19圖4缺氧/饑餓+E109處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變注：H/S+E1、H/S+E4、H/S+E6分別代表缺氧/饑餓環(huán)境下同時(shí)給予1μmol/L、4μmol/L、6μmol/LE109處理（后文中出現(xiàn)的縮寫，含義與此處相同，不再注明）。2.1.4缺氧環(huán)境下不同濃度恩度....

圖5缺氧+恩度處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變

部分細(xì)胞漂浮死亡，恩度濃度到達(dá)800μg/ml時(shí)，偽足數(shù)目的減少并不明顯，且漂浮死亡的細(xì)胞數(shù)較缺氧+400μg/ml恩度組未見(jiàn)明顯增加。單從形態(tài)學(xué)上分析，恩度對(duì)缺氧狀態(tài)下的HUVEC抑制作用較弱。具體如圖5所示。圖5缺氧+恩度處理后HUVEC的形態(tài)學(xué)改變

本文編號(hào)：3988772