發(fā)布時間：2025-03-19 04:36

　　CT-1042(4-乙基-8-氟-4-羥基-9-甲氧基-11-甲基-1,12-二氫-4H-2-氧雜-6,12a-二氮雜-二苯并[b,H]芴-3,13-二酮)是一種小分子化合物,在體外實驗中表現(xiàn)出對許多組織來源的腫瘤細胞都有抑制活性。非小細胞肺癌(NSCLC)發(fā)病率高且后果嚴(yán)重,雖然已有靶向藥物上市,但易發(fā)生耐藥,人群適用有限,研發(fā)新型抗肺癌藥物,仍是臨床迫切需求。CT-1042是一種抗癌活性很強的新型喜樹堿類化合物,但對肺癌細胞的作用和潛在機制卻不清楚。本研究在較為系統(tǒng)地評價CT-1042的抗癌特點的同時,重點評價和研究了CT-1042對NCI-H460 NSCLC細胞的抗癌特性及其分子機制。本研究用MTT實驗來評估細胞增生活性,并用流式細胞術(shù)(FCM)檢測細胞凋亡、線粒體膜電位(MMP)和進行細胞周期分析。進行實時定量PCR和Western blotting以確定相對的mRNA和蛋白質(zhì)表達水平。進行裸鼠皮下移植瘤實驗以評價CT-1042對體內(nèi)腫瘤生長的影響。實驗證實,CT-1042明顯抑制了12種腫瘤細胞的增殖,誘導(dǎo)了受試細胞中MMP的減少,并增加了相對Caspase-3的活性。細胞周...

【文章頁數(shù)】：154 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞對照表
摘要
abstract
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 藥品與主要試劑
        2.1.2 抗體
        2.1.3 實驗儀器
        2.1.4 受試藥
        2.1.5 細胞及實驗動物
    2.2 體外實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 MTT實驗
        2.2.3 Hoechst33342染色
        2.2.4 AnnexinV/PI雙染實驗
        2.2.5 線粒體膜電位(MMP)實驗
        2.2.6 細胞周期分析
        2.2.7 Caspase-3活性實驗
        2.2.8 細胞劃痕實驗
        2.2.9 Transwell實驗
        2.2.10 實時定量PCR(RT-qPCR)
        2.2.11 蛋白質(zhì)印跡法(WesternBlotting)
    2.3 體內(nèi)實驗方法
        2.3.1 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肺癌細胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治療作用
        2.3.2 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肝癌細胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治療作用
        2.3.3 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人結(jié)腸癌細胞(LoVo)皮下移植瘤的治療作用
        2.3.4 蘇木素-伊紅染色法(H&E)
        2.3.5 免疫組織化學(xué)法(IHC)
    2.4 聯(lián)合用藥實驗方法
        2.4.1 體外藥物聯(lián)合實驗
        2.4.2 兩藥聯(lián)合對細胞凋亡的影響
        2.4.3 兩藥聯(lián)合對細胞周期分布的影響
        2.4.4 兩藥聯(lián)合對mRNA表達的影響
        2.4.5 兩藥聯(lián)合對蛋白表達的影響
        2.4.6 體內(nèi)藥物聯(lián)合實驗
    2.5 統(tǒng)計學(xué)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 CT-1042對細胞增殖的抑制作用
    3.2 CT-1042對細胞核形態(tài)的影響
    3.3 CT-1042對腫瘤細胞凋亡的影響
    3.4 CT-1042對腫瘤細胞線粒體膜電位的影響
    3.5 CT-1042對腫瘤細胞周期分布的影響
    3.6 CT-1042對腫瘤細胞Caspase-3活性的影響
    3.7 CT-1042對腫瘤細胞遷移能力的影響
    3.8 CT-1042對腫瘤細胞mRNA表達的影響
    3.9 CT-1042對腫瘤細胞蛋白表達的影響
    3.10 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肺癌細胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治療作用(第一批)
    3.11 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肺癌細胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治療作用(第二批)
    3.12 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肝癌細胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治療作用(第一批)
    3.13 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人肝癌細胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治療作用(第二批)
    3.14 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人結(jié)腸癌細胞(LoVo)皮下移植瘤的治療作用(第一批)
    3.15 CT-1042對Nu/Nu裸小鼠人結(jié)腸癌細胞(LoVo)皮下移植瘤的治療作用(第二批)
    3.16 H&E染色和免疫組化
    3.17 聯(lián)合用藥實驗結(jié)果
        3.17.1 CT-1042聯(lián)合姜黃素(Curcumin)對肺癌細胞增殖的影響
        3.17.2 姜黃素增強CT-1042對肺癌細胞周期阻滯以及凋亡的誘導(dǎo)作用
        3.17.3 CT-1042聯(lián)合姜黃素對肺癌細胞mRNA表達的調(diào)控
        3.17.4 CT-1042聯(lián)合姜黃素對肺癌細胞蛋白表達的調(diào)控
        3.17.5 CT-1042聯(lián)合姜黃素對裸鼠皮下移植瘤的治療作用
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
附錄
個人簡歷
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：4036669