發(fā)布時(shí)間：2025-05-28 04:21

　　癌癥一直是世界性醫(yī)療難題,高復(fù)發(fā)率和致死率使其成為難以攻克的疾病。目前的治療方式主要有手術(shù)切除、化療、放射治療。近年來,越來越多的患者綜合考慮各方面因素而選擇化學(xué)療法。同時(shí),研究者們的目光也更多聚焦在化療領(lǐng)域,致力于高效低毒化療藥物的探索。在多樣化抗腫瘤藥物蓬勃發(fā)展的今天,金屬配合物被很多科學(xué)家青睞,并且取得了很多突破性成就,如順鉑、奧沙利鉑等,但是在應(yīng)用方面還有很多難題尚未解決。因此,尋找出具有特異性、靶向性、高效低毒的抗腫瘤藥物是我們所迫切需求的。本論文合成并純化一個(gè)系列釕（Ⅱ）配合物和三個(gè)系列銥（ⅡI）配合物,通過體外毒性評(píng)價(jià),發(fā)現(xiàn)其中大部分化合物對篩選腫瘤細(xì)胞株具有一定毒性,隨后對其抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行深入探究。然而其中有3個(gè)銥（ⅡI）配合物對腫瘤細(xì)胞幾乎無毒,我們采用卵磷脂及功能化磷脂將其制成具有靶向性的長循環(huán)制劑。以質(zhì)譜、紅外、紫外、熒光、透射電鏡、粒徑儀、¹H NMR、¹³C NMR等相關(guān)儀器對合成藥物進(jìn)行表征,并對其抗腫瘤活性及機(jī)制進(jìn)行研究與討論。本論文從以下幾個(gè)方面評(píng)價(jià)所選藥物的抗腫瘤活性及其機(jī)制:首先通過MTT比色法對配合物體外毒...

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 金屬配合物抗腫瘤研究進(jìn)展
        1.2.1 鉑金屬配合物抗腫瘤研究進(jìn)展
        1.2.2 釕金屬配合物抗腫瘤研究進(jìn)展
        1.2.3 銥金屬配合物抗腫瘤及生物應(yīng)用研究進(jìn)展
        1.2.4 其他金屬配合物抗腫瘤研究進(jìn)展
    1.3 藥物抗腫瘤研究方法
        1.3.1 細(xì)胞死亡方式
        1.3.2 藥物體外細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        1.3.3 細(xì)胞死亡方式檢測
    1.4 研究目的及選題意義
第二章 以PTCP為配體的釕(Ⅱ)配合物合成及體外抗腫瘤活性機(jī)制研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)器材
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 1,10-菲啰啉-5,6-二酮的合成
        2.3.2 配體PTCP的合成與表征
        2.3.3 Cis-[Ru(phen)₂Cl₂]?2H₂O的合成
        2.3.4 Cis-[Ru(dmp)₂Cl₂]?2H₂O的合成
        2.3.5 Cis-[Ru(ttbpy)₂Cl₂]?2H₂O的合成
        2.3.6 [Ru(phen)₂(PTCP)](ClO₄)₂(1)的合成
        2.3.7 [Ru(dmp)_₂(PTCP)](ClO4_)₂(2)的合成
        2.3.8 [Ru(ttbpy)₂(PTCP)](ClO₄)₂(3)的合成
        2.3.9 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.10 DNA結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        2.3.11 分子對接實(shí)驗(yàn)
        2.3.12 配合物的體外毒性檢測
        2.3.13 DNA損傷檢測
        2.3.14 凋亡分布及凋亡率檢測
        2.3.15 流式細(xì)胞儀檢測線粒體膜電位
        2.3.16 活性氧含量檢測
        2.3.17 細(xì)胞周期檢測
        2.3.18 侵襲效應(yīng)評(píng)價(jià)
        2.3.19 自噬作用研究
        2.3.20 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 DNA結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        2.4.2 粘度測定
        2.4.3 與DNA的分子對接實(shí)驗(yàn)
        2.4.4 配合物體外毒性檢測
        2.4.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡
        2.4.6 DNA損傷檢測
        2.4.7 活性氧的分析
        2.4.8 線粒體跨膜電位的檢測
        2.4.9 細(xì)胞周期阻滯結(jié)果
        2.4.10 細(xì)胞侵襲能力的探究
        2.4.11 自噬的檢測
        2.4.12 免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    2.5 小結(jié)
第三章 具有抗黑色素瘤活性的銥(Ⅲ)配合物合成及抗腫瘤機(jī)制研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 配體THPDP的合成與表征
        3.3.2 Cis-[Ir(ppy)₂Cl]₂的合成
        3.3.3 配合物[Ir(ppy)₂(THPDP)]PF₆(Ir-1)合成與表征
        3.3.4 DAPI染色法和AO/EB雙染法觀察細(xì)胞凋亡
        3.3.5 線粒體定位實(shí)驗(yàn)
        3.3.6 細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺水平檢測
        3.3.7 免疫染色法檢測細(xì)胞色素c的釋放
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        3.4.1 配合物的紫外、熒光光譜測定
        3.4.2 配合物對細(xì)胞增殖的影響
        3.4.3 Ir-1對B16細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響
        3.4.4 DNA損傷檢測
        3.4.5 Ir-1引起細(xì)胞內(nèi)活性氧變化檢測
        3.4.6 亞細(xì)胞定位及線粒體膜電位檢測
        3.4.7 細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺水平檢測
        3.4.8 細(xì)胞色素c釋放檢測
        3.4.9 Ir-1對B16細(xì)胞侵襲能力的影響
        3.4.10 Ir-1對B16自噬作用的影響
        3.4.11 Ir-1阻滯細(xì)胞周期在G2/M期
        3.4.12 Ir-1,NAC和3-MA對caspase-3、Bcl-2家族及cleaved-PARP表達(dá)影響
        3.4.13 Ir-1抑制PI3K/Akt/mTOR通路的活性
    3.5 小結(jié)
第四章 具有抗非小細(xì)胞肺癌活性的銥(Ⅲ)配合物合成及抗腫瘤機(jī)制研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 Cis-[Ir(bzq)₂Cl]₂的合成
        4.3.2 Cis-[Ir(piq)₂Cl]₂的合成
        4.3.3 配體adppz的合成與表征
        4.3.4 [Ir(ppy)₂(adppz)]PF₆(Ir-1)的合成與表征
        4.3.5 [Ir(bzq)₂(adppz)]PF₆(Ir-2)的合成與表征
        4.3.6 [Ir(piq)₂(adppz)]PF₆(Ir-3)的合成與表征
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 配合物的體外毒性
        4.4.2 細(xì)胞凋亡結(jié)果分析
        4.4.3 活性氧的定性與定量
        4.4.4 線粒體膜電位的變化
        4.4.5 細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺穩(wěn)態(tài)
        4.4.6 細(xì)胞色素c的釋放
        4.4.7 彗星實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.8 細(xì)胞周期分布檢測結(jié)果
        4.4.9 配合物抑制細(xì)胞侵襲
        4.4.10 免疫印跡結(jié)果分析
    4.5 小結(jié)
第五章 銥(Ⅲ)配合物合成及長循環(huán)制劑的體外、體內(nèi)抗腫瘤活性研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 配體及配合物合成路線
        5.3.2 配體CPIP合成
        5.3.3 配體DCPIP合成
        5.3.4 配體TCPIP合成
        5.3.5 [Ir(ppy)₂(CPIP)]PF₆(Ir-1)的合成與表征
        5.3.6 [Ir(ppy)₂(DCPIP)]PF₆(Ir-2)的合成與表征
        5.3.7 [Ir(ppy)₂(TCPIP)]PF₆(Ir-3)的合成與表征
        5.3.8 負(fù)載配合物的PEG化脂質(zhì)體的合成
        5.3.9 脂質(zhì)體的表征
        5.3.10 包封率及載藥量分析
        5.3.11 溶酶體通透性檢測
        5.3.12 亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)
        5.3.13 免疫熒光染色檢測微管變化
        5.3.14 體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 配合物和脂質(zhì)體的紫外及熒光光譜
        5.4.2 脂質(zhì)體的表征
        5.4.3 體外細(xì)胞毒性檢測
        5.4.4 Ir-Lipo的細(xì)胞內(nèi)定位
        5.4.5 溶酶體通透性檢測
        5.4.6 線粒體膜電位的改變
        5.4.7 活性氧水平升高
        5.4.8 彗星實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.9 凋亡檢測結(jié)果
        5.4.10 細(xì)胞周期阻滯結(jié)果
        5.4.11 Ir-Lipo引起細(xì)胞自噬
        5.4.12 免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.13 免疫熒光檢測微管蛋白變化
        5.4.14 體內(nèi)抑瘤效果評(píng)價(jià)
    5.5 小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況



本文編號(hào)：4048069