發(fā)布時間：2024-06-07 05:28

　　研究目的:前期工作證實(shí)PKG Ⅱ抑制胃癌的生物學(xué)行為;在此基礎(chǔ)上,通過檢測胃癌、腸癌患者血清和腫瘤組織PKG Ⅱ水平,分析其與臨床指標(biāo)相關(guān)性;利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)分析其潛在的機(jī)制;并進(jìn)一步探索PKG Ⅱ抗癌的廣譜性。研究方法:(1)ELISA試劑盒檢測胃癌和結(jié)直腸癌患者PKG Ⅱ水平,分析PKG Ⅱ與臨床病例資料的相關(guān)性。(2)以胃癌細(xì)胞株為研究對象,通過Illumina高通量測序平臺進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,分析胃癌細(xì)胞在重組蛋白PKG Ⅱ的作用下,轉(zhuǎn)錄組基因水平的變化。(3)根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果,采用實(shí)時熒光定量PCR,檢測重組蛋白GSTPKG Ⅱ?qū)ξ赴┘?xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平的影響,對轉(zhuǎn)錄組結(jié)果進(jìn)行初步驗(yàn)證。(4)采用Western blotting的方法,研究胃癌細(xì)胞株在重組PKG Ⅱ的作用下MMP11蛋白表達(dá)量的變化,以明確PKG Ⅱ?qū)�轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP11的調(diào)控。(5)通過CCK8、Transwell、TUNEL以及Western blotting的方法,研究PKG Ⅱ?qū)β殉舶┘?xì)胞生長、遷移以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,進(jìn)一步分析PKG Ⅱ是否具有廣譜的抗癌作用。研究結(jié)果:(1)胃癌和腸...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

俅蠶喙匭匝芯?6結(jié)構(gòu)域：PKGII分子有著高度保守的催化結(jié)構(gòu)域，主要由ATP結(jié)合位點(diǎn)，酶的活性中心和底物結(jié)合序列3部分組成[61]。當(dāng)無cGMP存在時，PKGII由于其自身具有抑制結(jié)構(gòu)從而不具備催化活性。當(dāng)出現(xiàn)cGMP時，PKGII的自身抑制被解除，發(fā)揮催化活性[68]。PKGI....

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文13表2.2正常人、胃癌患者、腸癌患者三組人的血清PKGII多重比較（Bonferroni校正法）Table2.2ThemultiplecomparisonofserumPKGIIinnormalpeople,gastriccancerandcolorecta....

和檢驗(yàn)，P>0.05，腸癌和胃癌患者的癌組織和癌旁組織的PKGII的相對含量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體結(jié)果見表2.3和圖2.2。表2.3癌組織和癌旁組織的PKGII相對含量M(Q)Table2.3ThePKGIIrelativecont....

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖3.1轉(zhuǎn)錄組測序?qū)嶒?yàn)流程Figure3.1Pipelineoftranscriptomesequencing3.1.2.4總RNA提取（1）對數(shù)生長期的HGC-27和AGS細(xì)胞，細(xì)胞的接種同3.1.2.2細(xì)胞樣品的處理；（2）用PBS清洗1～2次，換無血....

本文編號：3990851