發(fā)布時間：2024-06-29 10:54

　　研究目的:探討槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞體外增殖與凋亡作用的影響,為肝癌的藥物治療提供新的依據(jù)。研究方法:(1)細胞培養(yǎng):人肝癌SMMC-7721細胞用含10%胎牛血清的DMEM,在37℃、5%CO₂飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3d更換培養(yǎng)基,取對數(shù)生長期細胞進行后續(xù)實驗。(2)細胞處理及實驗分組:取上述細胞,經(jīng)胰酶消化后離心,棄上清,用培養(yǎng)液重懸后,調(diào)整細胞密度約為1*10⁴個/mL接種于96孔板中,100μL每孔,于37℃、5%CO₂的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜使細胞充分貼壁,將細胞隨機分為6組,對照組細胞不做處理,處理組按加入的槐定堿濃度不同分為5組,槐定堿濃度分別為0.5 mmol/L,1 mmol/L,2 mmol/L,4mmol/L,8mmol/L,每組設6個平行孔。繼續(xù)培養(yǎng)48h后,采用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化。(3)運用CCK8實驗檢測不同濃度槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞增殖的影響。(4)運用流式細胞法檢測不同濃度槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞凋亡的影響。(5)運用免疫印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫索引
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 研究目的及意義
    1.3 實驗技術(shù)
    1.4 實驗方案設計
第二章 槐定堿對肝癌細胞SMMC-7721 增殖與凋亡的影響
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.1.1 細胞復蘇
            2.2.1.2 細胞傳代培養(yǎng)
            2.2.1.3 細胞凍存
        2.2.2 實驗分組并通過倒置顯微鏡下觀察不同濃度的槐定堿對肝癌SMMC-7721 細胞形態(tài)學影響
        2.2.3 CCK8 實驗檢測不同濃度槐定堿對SMMC-7721 細胞增殖的影響
        2.2.4 流式細胞術(shù)檢測不同濃度槐定堿對SMMC-7721 細胞凋亡的影響
        2.2.5 免疫印跡法檢測不同濃度槐定堿對肝癌細胞凋亡相關(guān)蛋白表達水平的影響
        2.2.6 統(tǒng)計學處理
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 槐定堿對肝癌細胞形態(tài)學的影響
        2.3.2 槐定堿對肝癌細胞增殖的影響
        2.3.3 槐定堿對肝癌細胞凋亡的影響
        2.3.4 槐定堿對肝癌細胞凋亡相關(guān)蛋白表達水平的影響
    2.4 討論
    2.5 參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
碩士在讀期間發(fā)表的學術(shù)論文



本文編號：3997518