發(fā)布時間：2024-12-15 21:34

　　背景及目的:環(huán)狀RNA（Circular RNA）是呈現(xiàn)閉合環(huán)狀構(gòu)造的特別的非編碼RNA。隨著科學(xué)研究技術(shù)的發(fā)展越來越多的環(huán)狀RNA被研究者們所發(fā)掘,相應(yīng)地,關(guān)于它們的各種功能學(xué)研究也同步進(jìn)行中。其中,環(huán)狀RNA在腫瘤診斷及治療的領(lǐng)域的研究就是現(xiàn)今的焦點之一。肺癌的發(fā)生率及死亡率居于高位,尋找有效的治療及診斷手段迫在眉睫,因此其與肺腺癌關(guān)系的進(jìn)一步探究逐步引起學(xué)者們的重視。本研究在于探討hsa_circ₀002360在肺腺癌中的臨床價值,為今后肺腺癌的診療提供新的研討思路。方法:1.采集2018年1月到2019年9月期間在江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院胸外科住院行肺切除手術(shù)的肺癌患者組織標(biāo)本,按照要求篩出122例患者納入本次研究,術(shù)中取相應(yīng)癌旁組織標(biāo)本作為實驗對照組;另外,收集其中50例患者術(shù)前及術(shù)后第二天的外周血液標(biāo)本5ml,并采集50例門診體檢健康志愿者外周血5 ml。2.通過高通量測序技術(shù)檢測肺腺癌組織較正常組織中含量具有顯著差異的相關(guān)基因,篩選出環(huán)狀RNA hsa_circ₀002360作為研究對象。通過P...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
引言
第一章 HSA_CIRC₀002360 在肺腺癌中的表達(dá)及臨床意義
    1 實驗材料
        1.1 臨床標(biāo)本
        1.2 實驗試劑
        1.3 實驗儀器
    2 實驗方法
        2.1 總RNA的提取
        2.2 將RNA逆轉(zhuǎn)錄為c DNA
        2.3 實時熒光定量PCR
        2.4 瓊脂糖凝膠電泳
        2.5 結(jié)果處理
    3 實驗結(jié)果
        3.1 Hsa_circ₀002360 的鑒定及其在細(xì)胞中的表達(dá)
        3.2 Hsa_circ₀002360 在肺腺癌組織的含量與臨床特征分析
        3.3 Hsa_circ₀002360 在肺腺癌及健康人群血液中的含量
    4 討論
第二章 HSA_CIRC₀002360 促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞增殖遷移及侵襲
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 主要試劑配方
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 Si-RNA干預(yù)
        2.3 CCK8 實驗
        2.4 克隆形成實驗
        2.5 細(xì)胞劃痕實驗
        2.6 細(xì)胞transwell實驗
        2.7 統(tǒng)計學(xué)方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 Si-RNA干預(yù)效率測定
        3.2 Hsa_circ₀002360 的沉默可抑制肺腺癌細(xì)胞株增殖
        3.3 Hsa_circ₀002360 促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞株遷移及侵襲
    4 討論
第三章 HSA_CIRC₀002360 通過MIR-762/PODXL軸促進(jìn)肺腺癌進(jìn)展
    1 實驗材料
        1.1 實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 主要試劑配方
    2 實驗方法
        2.1 雙熒光素酶實驗
        2.2 蛋白提取
        2.3 免疫印跡法(Western blot)
        2.4 CCK8、克隆形成實驗、細(xì)胞劃痕實驗、Transwell
        2.5 免疫組化
        2.6 統(tǒng)計方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 MiR-762 充當(dāng)了has_circ₀002360 的海綿
        3.2 MiR-762 的改變影響has_circ₀002360 的生物學(xué)功能
        3.3 基因PODXL是 miR-762 的靶基因
        3.4 Has_circ₀002360 通過miR-762/PODXL軸促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞EMT
    4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：4016500