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OsRhoGAP2基因過(guò)表達(dá)改變水稻粒形的分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-30 20:31
  水稻的高產(chǎn)與品質(zhì)育種始終是水稻研究的重要目標(biāo)。水稻粒形是決定水稻產(chǎn)量的關(guān)鍵因素之一,并且與稻米的品質(zhì)有著密切的關(guān)系。盡管目前已發(fā)現(xiàn)多種信號(hào)通路與水稻粒形控制相關(guān),且很多控制粒形的QTLs也被鑒定,但是調(diào)控粒形的分子機(jī)制在很大程度上仍不清楚。本實(shí)驗(yàn)室前期以水稻Rop蛋白OsRacD為誘餌,利用酵母雙雜交技術(shù)從水稻幼穗cDNA文庫(kù)中篩選其相互作用蛋白的編碼基因,分離到一種功能未知的Rho GTP酶激活蛋白編碼基因,命名為OsRhoGAP2。為鑒定該基因的功能,實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了過(guò)表達(dá)植物載體pCAMBIA1302-OsRhoGAP2-eGFP,對(duì)水稻進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化,并獲得了陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因水稻植株(OE-OsRhoGAP2)。經(jīng)過(guò)篩選和檢測(cè)發(fā)現(xiàn),T2代轉(zhuǎn)基因水稻種子的粒形發(fā)生顯著變化,表現(xiàn)為粒長(zhǎng)變長(zhǎng)、粒寬變窄、粒厚變薄。本研究在此基礎(chǔ)上,以O(shè)sRhoGAP2過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻T3和T4代為材料,對(duì)OsRhoGAP2和水稻粒形的關(guān)系開(kāi)展研究。對(duì)T3代OE-OsRhoGAP2轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行鑒定,結(jié)果顯示,檢測(cè)的7棵轉(zhuǎn)基因水稻均為陽(yáng)性植株。qRT-PCR分析顯示,OsRhoGAP2基因在所檢測(cè)的7棵T3代轉(zhuǎn)基...

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1.擬南芥和水稻成熟種子的縱切示意圖

圖1-1.擬南芥和水稻成熟種子的縱切示意圖

和胚乳為胚胎的生長(zhǎng)奠定了基礎(chǔ),因此胚胎變大之前26]。此外,包括種子在內(nèi)的植物器官的最終大小主要由小由三倍體胚乳,二倍體母本胚珠和二倍體胚胎的協(xié)物的水稻,它的胚乳同擬南芥一樣,也是在胚胎發(fā)育之著種子的發(fā)育并沒(méi)有被吸收消耗,而是通過(guò)增殖發(fā)育起來(lái),最終形成有胚乳的種子。因此早期胚乳的....


圖1-2.淀粉生物合成途徑

圖1-2.淀粉生物合成途徑

支鏈淀粉是淀粉中含量較高的聚合物,含有各種長(zhǎng)度的直鏈。支鏈淀粉中大葡糖基單元通過(guò)引入鏈分支的α-1,6鍵連接[32]。淀粉的生物合成過(guò)程涉及一系列性[33]。直鏈淀粉由ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)和淀粉合成酶GBSS(GBSSSII)催化合成,而支鏈淀粉由AG....


圖3-1T3代OE-OsRhoGAP2水稻的PCR鑒定1:DL2000DNAMarker,2:以水為模板的PCR產(chǎn)物,3:WT水稻基因組DNA擴(kuò)增產(chǎn)物

圖3-1T3代OE-OsRhoGAP2水稻的PCR鑒定1:DL2000DNAMarker,2:以水為模板的PCR產(chǎn)物,3:WT水稻基因組DNA擴(kuò)增產(chǎn)物

第三章結(jié)果與分析3代OE-OsRhoGAP2水稻陽(yáng)性植株的鑒定轉(zhuǎn)基因水稻DNA水平的檢測(cè)別以野生型水稻和OsRhoGAP2基因過(guò)表達(dá)水稻T3代植株幼苗期葉片模板。利用載體上序列設(shè)計(jì)的特異性引物P1和P2,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。檢-1所示,所檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因植....


圖3-2OsRhoGAP2基因在水稻幼穗中的相對(duì)表達(dá)量WT:野生型;T3-1T3-7:T3代轉(zhuǎn)基因水稻不同株系

圖3-2OsRhoGAP2基因在水稻幼穗中的相對(duì)表達(dá)量WT:野生型;T3-1T3-7:T3代轉(zhuǎn)基因水稻不同株系

圖3-2OsRhoGAP2基因在水稻幼穗中的相對(duì)表達(dá)量WT:野生型;T3-1~T3-7:T3代轉(zhuǎn)基因水稻不同株系T3代OE-OsRhoGAP2水稻的表型分析野生型水稻成熟種子相比,T3代OE-OsRhoGAP2水稻成熟種子的形態(tài)發(fā)生了,呈現(xiàn)出粒長(zhǎng)變長(zhǎng),粒....



本文編號(hào):3999031

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