發(fā)布時(shí)間：2025-06-24 04:17

　　目的本文旨在探究編碼煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亞基的CYBA基因在先兆子癇孕婦胎盤(pán)中的表達(dá)和山東地區(qū)人群中該基因C242T位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與重度先兆子癇的相關(guān)性,為先兆子癇的發(fā)病機(jī)理提供新的理論依據(jù)。方法首先收集了2017年06月至2018年10月在青島大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科住院并分娩的先兆子癇和健康孕婦的胎盤(pán),從中隨機(jī)選取先兆子癇胎盤(pán)21例、健康胎盤(pán)21例作為研究對(duì)象。從胎盤(pán)組織提取總RNA和蛋白,分別用相對(duì)熒光定量PCR和Western-Blot方法檢測(cè)CYBA基因的表達(dá)情況。采用Graphpad Prism軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。另外收集了2014年1月至2017年12月在青島大學(xué)附屬醫(yī)院、山東省立醫(yī)院、濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院等就診的妊娠婦女的外周血。應(yīng)用R語(yǔ)言的logit模型(PS值?0.2SD),對(duì)民族、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)(BMI指數(shù))、孕次進(jìn)行1:1.2樣本數(shù)的傾向評(píng)分匹配,篩選出重度先兆子癇病例1184例、健康對(duì)照1421例作為研究對(duì)象。提取以上2605例研究對(duì)象的外周靜脈血DNA,通過(guò)TaqMan探針?lè)▽?duì)CYBA基因的C242T多態(tài)性進(jìn)行基因分型研究。P<0.0...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3匹配前后病例組和對(duì)照組的傾向評(píng)分分布

院倫理委員會(huì)根據(jù)赫爾辛基宣言的道德規(guī)范批準(zhǔn)。應(yīng)用Ri3863.4.3軟件的logit模型（PS值0.2SD），對(duì)研究對(duì)象民族、年齡、身體質(zhì)量指數(shù)(BMI指數(shù))、孕次進(jìn)行1:1.2樣本比例的傾向評(píng)分匹配（圖3），從1800例重度PE和5000例健康對(duì)照中篩選出重度PE病例11....

圖4Taqman探針?lè)�熒光定量PCR技術(shù)原理圖

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文基團(tuán)的猝滅作用被解除，熒光報(bào)告基團(tuán)的熒光信號(hào)被釋放出來(lái)，到熒光信號(hào)（圖4）。因此，在PCR反應(yīng)過(guò)程中，每復(fù)制一次特定個(gè)探針，釋放一個(gè)熒光信號(hào)，隨著PCR循環(huán)次數(shù)的增加，儀器檢形成一條呈“S”形的DNA擴(kuò)增曲線(xiàn)（圖5）。當(dāng)待測(cè)DNA中沒(méi)有不能與DNA片段結(jié)合，不....

圖5Taqman探針?lè)�熒光定量PCR技術(shù)擴(kuò)增曲線(xiàn)

就切斷一個(gè)探針，釋放一個(gè)熒光信號(hào)，隨著PCR循環(huán)次數(shù)的增加，儀器檢測(cè)到的熒光信號(hào)就形成一條呈“S”形的DNA擴(kuò)增曲線(xiàn)（圖5）。當(dāng)待測(cè)DNA中沒(méi)有靶基因時(shí)，熒光探針不能與DNA片段結(jié)合，不會(huì)被Taq酶的5→3'外切酶切斷，就不會(huì)釋放熒光信號(hào)，儀器檢測(cè)不到熒光信號(hào)，就形成一條與基線(xiàn)平....

圖6基因分型測(cè)序結(jié)果圖

3.5.3基因分型使用TIB-8600熒光定量PCR儀及其軟件對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行基因分型。隨機(jī)選取不同基因型DNA經(jīng)普通PCR擴(kuò)增后進(jìn)行一代測(cè)序驗(yàn)證（圖6），應(yīng)用BioEdit軟件讀取測(cè)序結(jié)果，測(cè)序結(jié)果與TaqMan探針?lè)ɑ�因分型結(jié)果進(jìn)行比較以驗(yàn)證TaqMan探針?lè)ǖ臏?zhǔn)確性。圖6....

本文編號(hào)：4052474