發(fā)布時間：2020-11-16 00:56

　　 研究目的(1)探索電針“足三里”穴能否改善脊髓損傷后大鼠腸道傳輸功能和感覺功能障礙。(2)明確該電針療法對脊髓損傷大鼠腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用。方法選取成年SPF級SD雌性大鼠96只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,采用隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行分組,抽取24只大鼠為對照組(sham,n=24),剩余大鼠采用重物墜落法建立重度脊髓損傷模型(SCI,n=72),每日對其進(jìn)行術(shù)后護(hù)理及排尿,sham組僅暴露棘突和椎板,不做脊髓損傷處理。所有造模及假手術(shù)組大鼠術(shù)后均予腹腔注射慶大霉素5000U/kg抗感染。24h后將BBB評分為0分的SCI大鼠隨機(jī)均分為3組:模型組(M,n=24)、電針組(E,n=24)和菌群移植組(FMT,n=24)。sham組和M組每日固定15min,E組每日電針“足三里”穴15min(疏密波,電流強(qiáng)度1-2m A),采集E組新鮮糞便配置成10%懸液,每日按1ml/100g體重灌胃FMT組。于實(shí)驗(yàn)結(jié)束(干預(yù)14天)后無菌操作收集各組大鼠新鮮糞便,進(jìn)行菌群16Sr DNA測序和生物信息學(xué)分析各組菌群分布情況,記錄大鼠24h排便量(濕重、干重和含水量),計(jì)算首粒黑便排出時間,行腸道敏感性測試,并取其結(jié)腸進(jìn)行HE染色觀察其病理形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果1.重度脊髓損傷的大鼠模型建立重物墜落法建立模型72只,術(shù)后24h的BBB評分均為0分,較sham組,神情倦態(tài),均伴有尿失禁、尿潴留現(xiàn)象,部分出現(xiàn)膿尿及血尿。表明重度脊髓損傷模型均造模成功。2.電針及菌群移植對腸道傳輸功能影響在濕重上,sham組與FMT組間無顯著差異(p=0.07),FMT組明顯多余M組(p=0.046);在含水量上,E組與FMT組均顯著大于M組(均為p0.001);首例黑便時間,E組與FMT組均顯著短于M組(均為p0.001),且E組也顯著短于sham組(p=0.011)。3.電針及菌群移植對腸道感覺功能的影響四組間在腹壁撤離反射評分中均無顯著差異(均為p0.05);4.電針及菌群移植對結(jié)腸病理改變的影響HE染色后光鏡下放大100倍及200倍結(jié)果顯示,在形態(tài)學(xué)上,M組腺體排列不規(guī)整,肌層變薄并有大量炎性細(xì)胞浸潤。E組與FMT組類似,均較M組織形態(tài)學(xué)出現(xiàn)明顯改善,腺體排列更規(guī)整,數(shù)量更多,肌層更厚,僅出現(xiàn)輕度肌層萎縮和少量炎性細(xì)胞的浸潤。5.電針及菌群移植對菌群改變的影響16Sr DNA的結(jié)果顯示,各組樣本取量足夠;使用Shannon指數(shù),Simpson指數(shù),Ace指數(shù)和Chao1指數(shù)進(jìn)行各組間腸道菌群各組比較,各組豐度及均勻度方面無明顯差別,均P0.05;但各組間菌落結(jié)構(gòu)組成均具有顯著性差異,Beta多樣性指數(shù)顯示,sham組與E組、sham與FMT組組間菌落有顯著性差異(P0.001),M組與E組,M組與FMT組組間菌落有顯著性差異(P0.001),其余各組無明顯差異;各組間菌落分布在門、綱、屬水平上菌群組成結(jié)構(gòu)上差異性顯著:其中電針和菌群干預(yù)在門水平可提高黑色素細(xì)菌門豐度,降低變形菌門和放線菌門的豐度,在綱水平上可有效減少γ-變形菌綱所占比例,但在屬水平上,電針及糞菌移植可能通過進(jìn)一步調(diào)整布勞蒂亞屬(Blautia)、杜氏桿菌屬(Dubosiella)和桿菌屬(Bacteroides)、桿菌屬(Bacteroides)、阿克曼屬(Akkermansia)及乳酸桿菌屬(Lactobacillus)等菌落豐度從而影響腸道功能。結(jié)論(1)電針“足三里”穴能夠顯著的改善脊髓損傷后腸道的運(yùn)動能力,引發(fā)形態(tài)學(xué)的良性變化,形態(tài)學(xué)結(jié)果與行為學(xué)結(jié)果具有一致性。(2)電針療法及其菌群可能通過改變脊髓損傷后腸道菌群的菌落結(jié)構(gòu)組成,從而改善腸道傳輸功能。
【學(xué)位單位】：上海體育學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：R245
【部分圖文】：

電針對重度脊髓損傷大鼠排便功能及腸道微生態(tài)調(diào)節(jié)作用的研究12圖1實(shí)驗(yàn)流程圖3.5實(shí)驗(yàn)方案3.5.1重度脊髓損傷大鼠模型建立方案將大鼠分為兩組，假手術(shù)處理的假手術(shù)組(sham,n=24)和脊髓損傷手術(shù)造模組(spinalcordinjurygroup,SCI,n=72)。所有大鼠腹腔注射3%戊巴比妥鈉，麻醉后剃毛，暴露背部T10至T13附近皮膚。將大鼠固定于手術(shù)臺，暴露背部進(jìn)行碘伏消毒。sham組大鼠切開背部體表皮膚，使用止血鉗鈍性分離淺筋膜，僅在空氣中暴露T10至T13處棘突和椎板5min，直接縫合。慶大霉素購于華潤雙鶴利民藥業(yè)有限公司，H3702116。脊髓損傷手術(shù)造模組采用重物墜落法參考ThomasAJ等人[78]的方法，使用NYUImpactorI型脊髓撞擊裝置(儀器購于美國w.m.keckcenter)進(jìn)行造模。步驟同上，咬除T11-T12之間椎板，形成骨窗。安裝NYUImpactorI型裝置，采用10g物重，從高度60mm處自由下落撞擊，對暴露骨窗處形成撞擊，造成脊髓的完全性損傷。撞擊時可見大鼠尾巴突然甩動，下肢突然抽搐，而后肌肉疲軟呈軟癱狀。無菌小棉球壓迫止血后，依次縫合肌肉層，皮層，傷口浸潤硫酸慶大霉素后將大鼠安置于動物電熱毯上，待其完全蘇醒后放置籠內(nèi)飼養(yǎng)。3.5.2術(shù)后評價(jià)模型方案造模結(jié)束24h后，由兩位實(shí)驗(yàn)員獨(dú)立進(jìn)行Basso-Beattie-Bresnahan評分即BBB評分：將老鼠放置在空曠地面上，地面干凈不潮濕，讓其自然爬行，觀察老

aAWR評分0分/1分(大鼠無反應(yīng)為

bAWR評分2分
【參考文獻(xiàn)】

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1 李軻;;25例脊髓損傷患者的腸道功能訓(xùn)練分析[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2015年17期

2 Thorsten Brechmann;Justyna Swol;Veronika Knop-Hammad;Jrg Willert;Mirko Aach;Oliver Cruciger;Wolff Schmiegel;Thomas A Schildhauer;Uwe Hamsen;;Complicated fecal microbiota transplantation in a tetraplegic patient with severe Clostridium difficile infection[J];World Journal of Gastroenterology;2015年12期

3 林麗芳;;不完全性脊髓損傷患者腸道功能評估與重建[J];當(dāng)代護(hù)士(下旬刊);2014年06期

4 Xiao-Peng Ma;Jue Hong;Cai-Ping An;Dan Zhang;Yan Huang;Huan-Gan Wu;Cui-Hong Zhang;Sian Meeuwsen;;Acupuncture-moxibustion in treating irritable bowel syndrome: How does it work?[J];World Journal of Gastroenterology;2014年20期

5 朱世瓊;唐芳;艾艷;;電針聯(lián)合綜合直腸功能訓(xùn)練促進(jìn)脊髓損傷患者直腸功能重建的效果觀察[J];實(shí)用醫(yī)院臨床雜志;2014年02期

6 陳增;冼慶林;劉曉艷;鄺鏡芳;何佩儀;賀振泉;;針刺夾脊穴治療脊髓損傷便秘臨床研究[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

7 譚菊香;榮麗;;腸道功能訓(xùn)練改善脊髓損傷后便秘的效果研究[J];護(hù)理研究;2014年01期

8 朱毅;李凝;;針刺干預(yù)脊髓損傷腸道功能障礙生物鐘基因研究進(jìn)展[J];中國康復(fù)理論與實(shí)踐;2013年10期

9 岳雨珊;謝斌;程潔;張文毅;朱毅;;電刺激治療脊髓損傷后神經(jīng)源性腸道功能障礙[J];世界華人消化雜志;2013年07期

10 朱黎婷;朱毅;張文毅;俞君;謝斌;;中醫(yī)藥在脊髓損傷神經(jīng)源性腸道功能障礙的研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2012年35期

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1 白春宏;骶神經(jīng)電刺激對脊髓損傷后腸道菌群移位和內(nèi)毒素血癥的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

2 洪麗莉;脊髓損傷模型大鼠的胃腸動力障礙及其電針調(diào)整作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2008年

本文編號：2885424