線粒體自噬引起線粒體鐵超載誘導Warburg效應介導Apelin-13促人主動脈血管平滑肌細胞增殖
發(fā)布時間:2025-04-18 06:02
目的:動脈粥樣硬化的主要特征之一是血管平滑肌的異常增殖。研究發(fā)現(xiàn)Apelin/APJ系統(tǒng)在動脈粥樣硬化、高血壓等疾病中起重要作用。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)線粒體自噬途徑和Warburg效應均可介導Apelin-13促HA-VSMCs增殖。本課題主要研究線粒體自噬是否引起鐵超載進而調控Warburg效應從而介導Apelin-13促HA-VSMCs增殖,揭示線粒體自噬-鐵超載-Warburg效應介導Apelin-13/APJ系統(tǒng)促HA-VSMCs增殖的新的分子機理。方法:1.Western Blot:檢測HA-VSMCs中PKM2,LDHA,MCT1,MCT4PINK1,Parkin的表達;2.RNA干擾:siRNA-PINK1-1069和siRNA-Parkin-899觀察HA-VSMCs中PINK1,Parkin的表達;3.質粒過表達:質粒轉染PINK1和Parkin,觀察HA-VSMCs中的PINK1和Parkin的表達;4.CCK8試劑盒檢測HA-VSMCs增殖情況;5.乳酸試劑盒檢測HA-VSMCs中乳酸含量;6.葡萄糖試劑盒檢測HA-VSMCs中葡萄糖含量;7.BCA細胞定量試劑盒測...
【文章頁數(shù)】:91 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 實驗材料
2.1 實驗細胞
2.2 主要試劑
2.3 主要儀器
第3章 實驗方法
3.1 人主動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)
3.2 Western blot(蛋白免疫印跡)
3.3 乳酸試劑盒檢測細胞外乳酸濃度
3.4 葡萄糖試劑盒檢測外細胞外葡萄糖濃度
3.5 siRNA干擾技術
3.6 線粒體螯合鐵檢測
3.7 線粒體ROS檢測
3.8 CCK8檢測
3.9 統(tǒng)計學方法
第4章 實驗結果
4.1 干擾線粒體自噬-Warburg效應抑制Apelin-13促HA-VSMCs增殖
4.2 增強線粒體自噬-Warburg效應誘導Apelin-13促HA-VSMCs增殖
4.3 干擾線粒體自噬抑制Apelin-13促HA-VSMCs中線粒體螯合鐵超載
4.4 線粒體靶向鐵螯合劑DXZ和線粒體抗氧化劑 Mito-TEMPO均抑制apelin-13誘導Warburg效應
第5章 討論
第6章 結論
參考文獻
文獻翻譯
發(fā)表綜述
作者攻讀學位期間的科研成果
致謝
本文編號:4040649
【文章頁數(shù)】:91 頁
【學位級別】:碩士
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摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 實驗材料
2.1 實驗細胞
2.2 主要試劑
2.3 主要儀器
第3章 實驗方法
3.1 人主動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)
3.2 Western blot(蛋白免疫印跡)
3.3 乳酸試劑盒檢測細胞外乳酸濃度
3.4 葡萄糖試劑盒檢測外細胞外葡萄糖濃度
3.5 siRNA干擾技術
3.6 線粒體螯合鐵檢測
3.7 線粒體ROS檢測
3.8 CCK8檢測
3.9 統(tǒng)計學方法
第4章 實驗結果
4.1 干擾線粒體自噬-Warburg效應抑制Apelin-13促HA-VSMCs增殖
4.2 增強線粒體自噬-Warburg效應誘導Apelin-13促HA-VSMCs增殖
4.3 干擾線粒體自噬抑制Apelin-13促HA-VSMCs中線粒體螯合鐵超載
4.4 線粒體靶向鐵螯合劑DXZ和線粒體抗氧化劑 Mito-TEMPO均抑制apelin-13誘導Warburg效應
第5章 討論
第6章 結論
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作者攻讀學位期間的科研成果
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