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RNA干擾HAS2基因表達對多囊卵巢綜合征大鼠卵巢顆粒細胞生物學特性及免疫因子的影響

發(fā)布時間:2024-07-05 01:30
  目的:探討透明質(zhì)酸合成酶2(HAS2)基因在多囊卵巢綜合征(PCOS)大鼠表達及RNA干擾其表達對卵巢顆粒細胞活力、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1和VEGF表達的影響。方法:建立DHEA致雌性SD大鼠PCOS模型,Western blot檢測PCOS大鼠卵巢組織中HAS2的蛋白表達;培養(yǎng)原代PCOS大鼠卵巢顆粒細胞,將合成的靶向抑制HAS2表達的siRNA轉(zhuǎn)染到細胞中,Western blot檢測轉(zhuǎn)染效果及轉(zhuǎn)染后48 h各組細胞中免疫抑制因子TGF-β1、VEGF和NF-κB信號通路相關蛋白的表達。CCK8及流式細胞儀分別檢測細胞活力和凋亡率。結(jié)果:HAS2在PCOS大鼠卵巢組織中高表達,轉(zhuǎn)染si-HAS2的大鼠卵巢顆粒細胞中HAS2的表達顯著低于NC組和對照組(P <0. 05);與NC組比較,si-HAS2組細胞活力顯著降低,凋亡率增加,TGF-β1、VEGF及NF-κB信號通路p-NF-κB、p-IκBα和下游cyclin D1、survivin的蛋白表達均顯著降低(P <0. 05)。結(jié)論:HAS2在PCOS大鼠卵巢組織中高表達,抑制大鼠卵巢顆粒細胞中HAS2表達可...

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 PCOS大鼠模型卵巢組織采集
        1.2.2 Western blot檢測兩組卵巢組織中HAS2的表達
        1.2.3 卵巢顆粒細胞的獲取
        1.2.4 分組及siRNA轉(zhuǎn)染
        1.2.5 CCK8檢測細胞活力
        1.2.6 流式細胞儀檢測凋亡
        1.2.7 TGF-β1、VEGF、p-NF-κB、p-IκB、cyclin D1和survivin蛋白表達檢測
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 HAS2在PCOS大鼠卵巢組織的表達
    2.2 si-HAS2轉(zhuǎn)染大鼠卵巢顆粒細胞的效果
    2.3 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細胞活力及凋亡的影響
    2.4 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細胞免疫因子表達的影響
    2.5 si-HAS2轉(zhuǎn)染對大鼠卵巢顆粒細胞NF-κB信號通路的影響
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