發(fā)布時間：2025-06-27 03:05

　　目的:研究孕期缺氧對子代神經(jīng)系統(tǒng)Wnt信號通路的影響。方法:孕鼠隨機分為正常組和缺氧組,每組各13只。缺氧組從孕第4天開始給予10.5%O2,正常組給予21%O2,在孕21天時,一部分孕鼠麻醉后取出胎鼠,立即稱重,接著取出胎鼠腦組織前部(含海馬組織),液氮澆灌后立即放入-80℃冰箱中保存。另外一部分孕鼠自然分娩,子代一個月后進行分籠,待6周時進行水迷宮實驗,檢測兩組大鼠的學習記憶能力,然后取出海馬組織。采用蛋白印跡方法和q-PCR方法分別檢測胎鼠腦組織和6周子代海馬組織中相關(guān)蛋白及基因的表達。采用甲基化測序檢測胎鼠腦組織和6周子代海馬組織中甲基化水平的變化。此外,經(jīng)5-aza處理PC12細胞后,檢測PC12細胞相關(guān)基因的表達情況。結(jié)果:孕期缺氧組胎鼠腦重和體重均下降,而腦重/體重的比值上升;缺氧組Wnt3a,Wnt7a,Wnt7b,Fzd4,β-catenin,Hif1a和Fosl1表達上調(diào),Lrp6的表達無統(tǒng)計學差異。在Sfrps中,僅有Sfrp4的表達下調(diào),且甲基化測序提示Sfrp4甲基化水平在缺氧組明顯升高。在調(diào)節(jié)基因組甲基化水平的基因中,Dnmt1和Dnmt3b的表達上調(diào)。使用5...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
引言
    參考文獻
第一部分 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
    1.4 常用緩沖液
    1.5 Real-time PCR引物
    1.6 方法
        1.6.1 實驗動物
        1.6.2 胎鼠體重及腦重的測量
        1.6.3 水迷宮實驗
        1.6.4 胎鼠前腦組織、6周子代海馬組織及PC12細胞Wnt亞型、Fzd4、Lrp5/6、β-catenin、Sfrps、Dnmts及Fosl1的mRNA表達水平等的檢測
        1.6.5 胎鼠前腦組織、6周子代海馬組織及PC12細胞中Hif1a、β-catenin及Active-β-catenin等蛋白表達水平的檢測
        1.6.6 甲基化測序檢測胎鼠前腦組織及6周子代海馬組織中Sfrp4啟動子區(qū)域的甲基化水平
    1.7 統(tǒng)計分析
第二部分 實驗結(jié)果
    2.1 孕期缺氧對胎鼠腦重、體重及腦重/體重比值的影響
    2.2 孕期缺氧導致胎鼠血氧水平及血氧飽和度下降
    2.3 孕期缺氧導致胎鼠腦組織中Hif1a和Wnt/β-catenin信號通路的上調(diào)
    2.4 孕期缺氧導致胎鼠腦組織中Sfrp4甲基化水平升高及表達下調(diào)
    2.5 孕期缺氧抑制6周子代海馬組織Wnt/β-catenin信號通路的激活
    2.6 孕期缺氧導致6周子代海馬空間學習與記憶的下降
    2.7 經(jīng)5-aza-2'-deoxycytidine處理的PC12細胞其Sfrp4表達上調(diào)及活化的β-catenin蛋白水平下調(diào)
    2.8 Dnmts,Sfrp4和Wnt/β-catenin信號通路從胎鼠期到6周子代的表觀遺傳修飾重編程
第三部分 討論
結(jié)論
參考文獻
綜述 Sfrps及表觀修飾與相關(guān)疾病的研究進展
    參考文獻
英文縮略詞表
攻讀碩士研究生期間發(fā)表論文及參與的研究項目
致謝



本文編號：4053706