發(fā)布時(shí)間：2020-12-03 03:30

　　目的 利用miniSOG標(biāo)簽觀察鼻病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2B蛋白在細(xì)胞中定位及自噬體產(chǎn)生。方法 將非結(jié)構(gòu)蛋白2B和miniSOG進(jìn)行融合表達(dá)構(gòu)建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag質(zhì)粒,將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,在熒光顯微鏡下,2B-miniSOG陽性細(xì)胞進(jìn)行固定、光氧化及超薄切片制備,電鏡下觀察2B-miniSOG蛋白在細(xì)胞中的定位及細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化,Western blot（WB）檢測LC3的表達(dá)。結(jié)果 2B-miniSOG蛋白在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光,WB檢出自噬標(biāo)志性蛋白LC3－II表達(dá)增加。電鏡下觀察到蛋白定位于線粒體,細(xì)胞中出現(xiàn)大量囊泡樣結(jié)構(gòu),可觀察到自噬體和自噬溶酶體。結(jié)論 鼻病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2B可引起細(xì)胞自噬發(fā)生。 

【文章來源】：中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2019年01期 第21-24頁

【文章頁數(shù)】：4 頁


本文編號：2895921