發(fā)布時間：2024-06-12 05:33

　　背景和立題依據(jù)：由病原微生物感染引起的傳染病是人類健康和生命的主要威脅之一。目前發(fā)現(xiàn),90%以上的人類傳染病經(jīng)由黏膜途徑感染。然而,黏膜抗感染免疫機制至今不明。黏膜抗感染免疫不同于系統(tǒng)免疫,與系統(tǒng)免疫系統(tǒng)相比,黏膜處于一個長期帶菌的環(huán)境,接觸不同來源和性質(zhì)的抗原,這就要求黏膜免疫系統(tǒng)對有害抗原和無害抗原具有區(qū)別能力,并反饋為不同的免疫反應(yīng)。對于食物,正常菌群等無害抗原,腸道黏膜免疫系統(tǒng)表現(xiàn)為免疫耐受,避免發(fā)生超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病,而與無害抗原相反,腸道內(nèi)的病原體等有害抗原可以被腸道黏膜免疫系統(tǒng)識別,并引起免疫應(yīng)答。然而,黏膜免疫的機制至今不明。腸道黏膜免疫系統(tǒng)是機體免疫系統(tǒng)中最大也是最為復(fù)雜的部分,也最具有代表性。大量研究數(shù)據(jù)揭示,腸道黏膜免疫系統(tǒng)的免疫耐受機制主要有調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg)介導(dǎo),而誘導(dǎo)性Treg的產(chǎn)生與腸道黏膜微環(huán)境密不可分,這種特殊聯(lián)系來源于腸道黏膜免疫系統(tǒng)的幾種細(xì)胞或細(xì)胞亞群分泌的維甲酸。上述資料提示,腸道具有分泌維甲酸能力的細(xì)胞或細(xì)胞亞群可能在腸道免疫耐受機制中發(fā)揮了重要作用。 研究內(nèi)容及意義：本文通過研究腸道派氏結(jié)中不...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
前言
中文摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第一章 引言
    1.1 黏膜免疫
    1.2 腸道黏膜免疫系統(tǒng)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞
    1.3 維甲酸
    1.4 論文研究內(nèi)容及目的
    1.5 本論文創(chuàng)新之處
第二章 腸道派氏結(jié)中發(fā)現(xiàn)一群分泌高濃度維甲酸的嗜酸性粒細(xì)胞
    2.1 材料及方法
        2.1.1 試劑及儀器
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 分離派氏結(jié)中CD11c⁺細(xì)胞
        2.1.4 檢測派氏結(jié)中CD11c⁺細(xì)胞中各亞群細(xì)胞的醛脫氫酶活性
        2.1.5 檢測派氏結(jié)CD11c⁺CD11b^hi CD8^-亞群細(xì)胞表面相關(guān)分化抗原和蛋白的表達
        2.1.6 派氏結(jié)CD11c⁺CD11b^hi CD8^-細(xì)胞瑞氏染色
        2.1.7 分離PP-Eos
        2.1.8 維甲酸液相色譜的分析和建立
        2.1.9 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞維甲酸
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 腸道派氏結(jié)CD11c⁺細(xì)胞中,發(fā)現(xiàn)一群高表達醛脫氫酶活性的細(xì)胞
        2.2.2 派氏結(jié)中高表達醛脫氫酶活性的CD11c⁺CD11^hi CD8^-亞群細(xì)胞是嗜酸性粒細(xì)胞(Peyer's patches eosinophils,PP-Eos)
        2.2.3 腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞分泌高濃度維甲酸
    2.3 討論
第三章 PP-Eos分泌低濃度Treg誘導(dǎo)因子(TGF-β1和IL-2)
    3.1 材料及方法
        3.1.1 試劑及儀器
        3.1.2 實驗動物
        3.1.3 分離派氏結(jié)中CD11c⁺細(xì)胞
        3.1.4 雙抗體夾心ELISA法測定腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞培養(yǎng)上清中TGF-P與IL-2的濃度
    3.2 實驗結(jié)果腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞分泌低濃度TGF-β1與IL-2
    3.3 討論
第四章 PP-Eos誘導(dǎo)Treg(CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺細(xì)胞)分化
    4.1 材料及方法
        4.1.1 試劑及儀器
        4.1.2 實驗動物
        4.1.3 分離腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞
        4.1.4 分離初始型T細(xì)胞
        4.1.5 腸道派氏結(jié)嗜酸性細(xì)胞與初始型T細(xì)胞共培養(yǎng)
        4.1.6 Treg檢測試劑盒檢測共培養(yǎng)上清中CD25和Foxp3雙陽性Treg
        4.1.7 雙抗體夾心ELISA法測定共培養(yǎng)上清中TGF-β,IL-4,IL-17與IFN-γ的濃度
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 PP-Eos誘導(dǎo)初始型T細(xì)胞向Treg方向分化
        4.2.2 PP-Eos抑制初始型T細(xì)胞向Th1和Th17方向分化
    4.3 討論
第五章 外周血Eos的表型,維甲酸分泌以及對初始型T細(xì)胞分化方向的影響
    5.1 材料及方法
        5.1.1 試劑及儀器
        5.1.2 實驗動物
        5.1.3 分離外周血嗜酸性粒細(xì)胞
        5.1.4 流式檢測外周血嗜酸性粒細(xì)胞表型
        5.1.5 流式檢測外周血嗜酸性粒細(xì)胞醛脫氫酶活性
        5.1.6 液質(zhì)聯(lián)用檢測外周血嗜酸性粒細(xì)胞的維甲酸分泌
        5.1.7 Treg檢測試劑盒檢測外周血嗜酸性粒細(xì)胞和初始型T細(xì)胞共培養(yǎng)上清中CD25和Foxp3雙陽性Treg
    5.2 實驗結(jié)果
        5.2.1 外周血嗜酸性粒細(xì)胞表型
        5.2.2 外周血嗜酸性粒細(xì)胞的維甲酸分泌
        5.2.3 外周血嗜酸性粒細(xì)胞對T細(xì)胞Treg分化方向的影響
    5.3 討論
6 綜述
參考文獻
附錄
作者簡歷與攻讀學(xué)位期間取得的科研成果



本文編號：3993298