發(fā)布時(shí)間：2024-05-30 03:26

　　目的對腺相關(guān)病毒AAV2/8-Ca MKIIα-ChR2-m Cherry在大鼠內(nèi)側(cè)前額葉谷氨酸能神經(jīng)元中表達(dá)的組織學(xué)及通道功能予以鑒定。方法以立體定位注射技術(shù)將腺相關(guān)病毒AAV2/8-Ca MKIIα-ChR2-m Cherry注射到SD雄性大鼠內(nèi)側(cè)前額葉,當(dāng)病毒注射3⁴周后,采用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測標(biāo)記蛋白(m Cherry)在谷氨酸能神經(jīng)元(特異啟動(dòng)子Ca MKIIα)的表達(dá)情況;利用在體細(xì)胞外記錄技術(shù)觀測谷氨酸能神經(jīng)元所表達(dá)的通道蛋白(ChR2)對不同光刺激頻率的電生理反應(yīng)特性。結(jié)果病毒成功注射到內(nèi)側(cè)前額葉并特異表達(dá)通道蛋白于谷氨酸能神經(jīng)元的細(xì)胞膜上,表達(dá)成功率為(94.6±0.9)%;表達(dá)ChR2通道蛋白的谷氨酸能神經(jīng)元對藍(lán)光(470 nm,20 m W/mm2,5 ms波寬,5⁸0 Hz)產(chǎn)生穩(wěn)定的光激活反應(yīng),并且對低頻光刺激(5、10、20 Hz)的反應(yīng)性優(yōu)于高頻光刺激(40 Hz和80 Hz;P<0.001)。結(jié)論腺相關(guān)病毒AAV2/8-Ca MKIIα-ChR2-m Cherry能成功表達(dá)在谷氨酸能神經(jīng)元的細(xì)胞膜上...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 病毒注射
    1.3 免疫組化
    1.4 在體光誘發(fā)細(xì)胞外記錄
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 免疫組化證實(shí)ChR2-m Cherry特異表達(dá)在谷氨酸能神經(jīng)元上
    2.2 在體光誘發(fā)細(xì)胞外記錄
3 討論



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