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人孤雌胚胎干細胞誘導分化為腸上皮干細胞的研究

發(fā)布時間:2024-06-02 19:15
  背景和目的: 腸上皮損傷包括克隆氏病、潰瘍性結腸炎、短腸綜合征、放射性腸炎等,可引起消化吸收障礙,嚴重時甚至危及到患者生命,是當今臨床治療上的一個難題。將具有腸上皮修復潛能的腸上皮干細胞(intestinal epithelial stem cell, IESC)應用于腸上皮損傷的治療,已成為目前國內外研究的熱點之一,但在體外原代培養(yǎng)IESC比較困難,大大限制了其在臨床中的應用。人孤雌胚胎干細胞(human parthenogenetic embryonic stem cell, hPESC)由于可避免移植免疫排斥、倫理學爭端等問題,有望成為誘導分化為IESC的重要細胞來源。本研究擬探討hPESC體外培養(yǎng)的最佳條件和體外分階段誘導hPESC分化為IESC的可行性及條件。 方法: 1、采用胰蛋白酶消化法原代培養(yǎng)人包皮成纖維細胞(human foreskin fibroblast, hFF),倒置顯微鏡下觀察其生長狀態(tài),并采用免疫細胞化學染色對其進行鑒定。 2、建立hPESC體外培養(yǎng)的三種不同體系:以MEF為飼養(yǎng)層、以hFF為飼養(yǎng)層和無血清無飼養(yǎng)層體系,觀察hPESC在不同體系中的生長狀態(tài)...

【文章頁數(shù)】:137 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 人孤雌胚胎干細胞培養(yǎng)體系的優(yōu)化
    引言
    材料
    方法
    結果
    討論
第二部分 人孤雌胚胎干細胞向限定性內胚層分化
    引言
    材料
    方法
    結果
    討論
第三部分 限定性內胚層向腸上皮干細胞分化
    引言
    材料
    方法
    結果
    討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀博士期間已刊文章及參編論著
致謝



本文編號:3987665

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