魔芋葡甘聚糖/納米羥基磷灰石/殼聚糖骨替代支架成骨誘導機制的研究
發(fā)布時間:2020-12-07 23:25
[目的]課題組前期研究表明萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復合魔芋葡甘聚糖/納米羥基磷灰石/殼聚糖(konjac glucomannan/nano-hydroxyapatite/chitosan, KHC)骨替代支架材料對兔感染性骨缺損模型具有良好的抗感染性及骨修復活性,KHC骨替代支架是如何誘導新骨形成是KHC骨替代材料研發(fā)過程中必須搞清楚的一個問題,通過體外實驗研究KHC骨替代支架對骨髓間充質(zhì)干細胞、成骨細胞增殖、分化等細胞生物學行為的影響,從BMPs信號通路及FGFS/FGFR信號通路探討KHC骨替代支架材料的成骨誘導機制。[方法]第一部分1.采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)擴增C57BL小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs).通過形態(tài)學及生物功能鑒BMSCs。2.在倒置相差顯微鏡、掃描電鏡下觀察BMSCs在KHC骨替代支架上的生長、形態(tài)和黏附情況。3.KHC骨替代支架與BMSCs復合培養(yǎng)于24孔板中,以單純的BMSCs培養(yǎng)為陰性對照,以0.64%苯酚與BMSCs復合培養(yǎng)為陽性對照,在24h、48h、72h收集樣本,利用MTT法檢測BM...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學云南省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1骨形成過程??
??圖1-11掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(X500)?..??圖1-12掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(xlOOO)??掃描電鏡下KHC表面呈現(xiàn)凹凸不平多孔的表面形貌,能譜分析分析結(jié)果表明??KHC骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。(圖1-13)??7.6??Ca??6.1?-??4.6?—??KCnt??3。-?P??1.S?-?〇??lli—....--??1.60?2.00?3.00?4.0D?5.00?6.00?7.00?8.00??Energy?-?keV??圖1-13?KHC
為了研巧KHC骨替代支架對成骨細胞的影響,本研究利用qPCR方法對KHC骨??替代支架上MC3T3-E1成骨細胞的成骨分化基因(Runx2,?BMP-4,?BMPR-1?A,??FGFR-l)進行定量分析。實驗結(jié)果如圖2-5所示,陰性誘導組Runx2在2w時表達??量達到最高,KHC骨替代支架材料在Iw和3w時表達受抑制,在2w時表達量達最??高,在3w時同種異體人工骨Runx2表達量達最高。隨著時間的推移各組BMP-4表??達置逐漸増高,2W時各組BMP-4表達水平達到最高,KHC骨替代支架誘導培養(yǎng)??組BMP-4明盈高于其他組,3w時各沮BMP-4表達量均略有下降。隨著時間推移??KHC骨替代支架普通培養(yǎng)基培養(yǎng)組BMP艮I?A表達量逐漸升高,第3w時達3.2倍。??隨著時間的推移各姐FGFR-1表達量組建增高,在第Hw達到最高峰,前兩周??FGFR-1表達均受到不同程度的抑制,在第3w時FGFR-1化學誘導組表達量高于未??誘導組
【參考文獻】:
期刊論文
[1]納米羥基磷灰石復合重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2人工骨治療骨缺損的研究[J]. 曾建華,熊龍,李經(jīng)堂,嚴亮,凌蒙. 南昌大學學報(醫(yī)學版). 2014(08)
[2]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學特性及優(yōu)勢[J]. 李雙月,戚媛,陳若琳,王哲敏,劉爽,樸豐源. 中國組織工程研究. 2014(10)
[3]透明質(zhì)酸鈉/魔芋葡甘聚糖復合多孔膜的制備及性能研究[J]. 朱維波,王端誠,顏廷亭,冷崇燕,陳慶華. 材料導報. 2014(04)
[4]魔芋止血劑的止血作用及局部用藥的安全性評價[J]. 夏忠玉,孫國兵. 華西藥學雜志. 2013(04)
[5]殼聚糖/魔芋葡甘露聚糖復合膜對實質(zhì)臟器創(chuàng)傷外科止血的實驗研究[J]. 任波,畢京峰,劉芳婷,董剛,徐晨,畢振華,王兆海,吳紅. 中國醫(yī)藥導刊. 2013(06)
[6]影響羧甲基魔芋膠骨架片體外釋藥的處方和工藝因素[J]. 劉蔚,張瑜,楊磊,宋衛(wèi)中. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2012(04)
[7]載苦參堿的魔芋葡甘聚糖多孔雜化水凝膠緩釋膠囊的制備和體外釋放評價[J]. 劉艷華,馬妍妮,王文蘋. 寧夏醫(yī)科大學學報. 2012(10)
[8]萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖治療兔慢性感染性骨缺損[J]. 黃金亮,馬濤,唐輝,范新宇,徐永清. 中國修復重建外科雜志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞的定向誘導分化[J]. 陳鵬飛,吳小翎,周偉,彭陽,蘆曦. 中國生物制品學雜志. 2011(01)
[10]κ-卡拉膠/魔芋膠骨架片的體外釋藥特性研究[J]. 張瑜,杜才偉,王玲. 中成藥. 2010(05)
碩士論文
[1]羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖復合骨組織工程支架的制備及研究[D]. 洪東峰.昆明理工大學 2009
本文編號:2904064
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學云南省
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1骨形成過程??
??圖1-11掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(X500)?..??圖1-12掃描電鏡下KHC骨替代支架BMSCs形貌(xlOOO)??掃描電鏡下KHC表面呈現(xiàn)凹凸不平多孔的表面形貌,能譜分析分析結(jié)果表明??KHC骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。(圖1-13)??7.6??Ca??6.1?-??4.6?—??KCnt??3。-?P??1.S?-?〇??lli—....--??1.60?2.00?3.00?4.0D?5.00?6.00?7.00?8.00??Energy?-?keV??圖1-13?KHC
為了研巧KHC骨替代支架對成骨細胞的影響,本研究利用qPCR方法對KHC骨??替代支架上MC3T3-E1成骨細胞的成骨分化基因(Runx2,?BMP-4,?BMPR-1?A,??FGFR-l)進行定量分析。實驗結(jié)果如圖2-5所示,陰性誘導組Runx2在2w時表達??量達到最高,KHC骨替代支架材料在Iw和3w時表達受抑制,在2w時表達量達最??高,在3w時同種異體人工骨Runx2表達量達最高。隨著時間的推移各組BMP-4表??達置逐漸増高,2W時各組BMP-4表達水平達到最高,KHC骨替代支架誘導培養(yǎng)??組BMP-4明盈高于其他組,3w時各沮BMP-4表達量均略有下降。隨著時間推移??KHC骨替代支架普通培養(yǎng)基培養(yǎng)組BMP艮I?A表達量逐漸升高,第3w時達3.2倍。??隨著時間的推移各姐FGFR-1表達量組建增高,在第Hw達到最高峰,前兩周??FGFR-1表達均受到不同程度的抑制,在第3w時FGFR-1化學誘導組表達量高于未??誘導組
【參考文獻】:
期刊論文
[1]納米羥基磷灰石復合重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2人工骨治療骨缺損的研究[J]. 曾建華,熊龍,李經(jīng)堂,嚴亮,凌蒙. 南昌大學學報(醫(yī)學版). 2014(08)
[2]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學特性及優(yōu)勢[J]. 李雙月,戚媛,陳若琳,王哲敏,劉爽,樸豐源. 中國組織工程研究. 2014(10)
[3]透明質(zhì)酸鈉/魔芋葡甘聚糖復合多孔膜的制備及性能研究[J]. 朱維波,王端誠,顏廷亭,冷崇燕,陳慶華. 材料導報. 2014(04)
[4]魔芋止血劑的止血作用及局部用藥的安全性評價[J]. 夏忠玉,孫國兵. 華西藥學雜志. 2013(04)
[5]殼聚糖/魔芋葡甘露聚糖復合膜對實質(zhì)臟器創(chuàng)傷外科止血的實驗研究[J]. 任波,畢京峰,劉芳婷,董剛,徐晨,畢振華,王兆海,吳紅. 中國醫(yī)藥導刊. 2013(06)
[6]影響羧甲基魔芋膠骨架片體外釋藥的處方和工藝因素[J]. 劉蔚,張瑜,楊磊,宋衛(wèi)中. 河南大學學報(醫(yī)學版). 2012(04)
[7]載苦參堿的魔芋葡甘聚糖多孔雜化水凝膠緩釋膠囊的制備和體外釋放評價[J]. 劉艷華,馬妍妮,王文蘋. 寧夏醫(yī)科大學學報. 2012(10)
[8]萬古霉素陽離子脂質(zhì)體復合納米羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖治療兔慢性感染性骨缺損[J]. 黃金亮,馬濤,唐輝,范新宇,徐永清. 中國修復重建外科雜志. 2012(02)
[9]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞的定向誘導分化[J]. 陳鵬飛,吳小翎,周偉,彭陽,蘆曦. 中國生物制品學雜志. 2011(01)
[10]κ-卡拉膠/魔芋膠骨架片的體外釋藥特性研究[J]. 張瑜,杜才偉,王玲. 中成藥. 2010(05)
碩士論文
[1]羥基磷灰石/殼聚糖/魔芋葡甘聚糖復合骨組織工程支架的制備及研究[D]. 洪東峰.昆明理工大學 2009
本文編號:2904064
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