發(fā)布時(shí)間：2020-12-15 00:25

　　研究背景冠狀動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是造成急性冠脈綜合征（ACS）的主要原因,導(dǎo)致大多數(shù)心血管事件的發(fā)生。它是動(dòng)脈壁的一種慢性炎癥性疾病,血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙在動(dòng)脈粥樣硬化的早期起著關(guān)鍵作用,過量的脂質(zhì)和炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是斑塊形成的主要因素。受累動(dòng)脈病變先是內(nèi)皮功能障礙、然后內(nèi)膜內(nèi)廣泛的脂質(zhì)沉積,吞噬細(xì)胞和血小板粘附、聚集以及炎性因子的釋放造成炎癥反應(yīng)。PECAM-1在內(nèi)皮細(xì)胞表面有表達(dá),尤其血管內(nèi)皮細(xì)胞連接部位高度表達(dá),有研究認(rèn)為PECAM-1在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用,其作為內(nèi)皮細(xì)胞表面機(jī)械感受器調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的變化。氧化應(yīng)激引起的活性氧（ROS）產(chǎn)生是許多血管疾病的重要原因。ROS主要由NADPH氧化酶產(chǎn)生,在生理?xiàng)l件下,血管NADPH氧化酶具有較低的活性。然而,NADPH氧化酶含量可以在脂多糖（LPS）等刺激物的作用下得到提高,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞功能改變,引起炎癥反應(yīng),破壞血管穩(wěn)態(tài)。PARP-1是一種高度保守的DNA結(jié)合核酶,在氧化應(yīng)激DNA損傷時(shí)被激活,PARP-1可以調(diào)節(jié)各種關(guān)鍵炎癥因子的表達(dá),包括細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）和血管細(xì)胞粘附分子1（VCAM-1）等。PARP-... 

【文章來源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
主要符號(hào)表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1.1 主要材料和儀器設(shè)備
        1.1.1 主要材料
        1.1.2 儀器設(shè)備
    1.2 細(xì)胞株培養(yǎng)
        1.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        1.2.2 細(xì)胞換液及傳代
        1.2.3 細(xì)胞凍存
    1.3 研究方法
        1.3.1 技術(shù)路線圖
        1.3.2 分組方法
    1.4 Western blot
        1.4.1 配膠
        1.4.2 配液
        1.4.3 提蛋白
        1.4.4 SDS-PAGE電泳
        1.4.5 轉(zhuǎn)膜
        1.4.6 封閉
        1.4.7 一抗孵育
        1.4.8 二抗孵育
        1.4.9 化學(xué)發(fā)光顯影
    1.5 細(xì)胞免疫熒光
    1.6 ELISA
    1.7 DCFDA熒光檢測(cè)ROS
    1.8 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    2.1 最適濃度的選擇
        2.1.1 PECAM-1 siRNA最適抑制濃度
        2.1.2 Apocynin的最適抑制濃度
        2.1.3 DPQ的最適抑制濃度
    2.2 LPS誘導(dǎo)HAEC中 ROS、NOX4、PARP-1蛋白及炎性因子生成增加
        2.2.1 LPS促進(jìn)ROS的產(chǎn)生
        2.2.2 LPS誘導(dǎo)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中NOX4 表達(dá)量增加
        2.2.3 LPS誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞PARP-1蛋白及炎性因子的表達(dá)增加
    2.3 NOX4/ROS參與PECAM-1對(duì)PARP-1蛋白及炎性因子表達(dá)的調(diào)控
        2.3.1 NOX4/ROS上調(diào)PARP-1及炎性因子的表達(dá)
        2.3.2 PECAM-1上調(diào)PARP-1蛋白及炎性因子的表達(dá)
        2.3.3 抑制PECAM-1能減輕LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)
        2.3.4 LPS上調(diào)PECAM-1表達(dá)
        2.3.5 PARP-1蛋白促進(jìn)炎性因子VCAM-1、ICAM-1、MCP-1表達(dá)
        2.3.6 PECAM-1對(duì)ROS的表達(dá)沒有明顯的調(diào)控作用
討論
結(jié)論
創(chuàng)新與不足
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào)：2917288