發(fā)布時(shí)間：2024-07-06 08:48

　　本論文設(shè)計(jì)合成了兩個(gè)新型咔唑衍生物1和2,利用多種實(shí)驗(yàn)方法深入研究了1和2與DNA的相互作用、HepG2細(xì)胞成像及活性,并得到了以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)以9-乙基-3-甲�；�咔唑?yàn)槠鹗荚�料分別經(jīng)一步和兩步反應(yīng)得到目標(biāo)化合物1和2,用¹H-NMR、¹³C-NMR和HRMS對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。(2)紫外可見(jiàn)吸收滴定和FID實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,相對(duì)于雙鏈DNA和i-motif來(lái)說(shuō),化合物1和2都能選擇性的優(yōu)先與G-四鏈體DNA結(jié)合,而且化合物1與所有DNA的結(jié)合能力強(qiáng)于2的;Job Plot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,化合物1和2與bcl-2的結(jié)合計(jì)量比均為1.5:1,與其他G-四鏈體DNA的結(jié)合計(jì)量比為2:1,1與i-motif的結(jié)合計(jì)量比為2:1,盡管未能準(zhǔn)確測(cè)試2與i-motif的結(jié)合計(jì)量比;CD實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了化合物1和2的結(jié)合不會(huì)顯著影響DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu);熒光壽命和熒光滴定實(shí)驗(yàn)都說(shuō)明了化合物1和2可以和DNA相互作用,而且化合物1可作為雙鏈DNA探針?lè)肿?而化合物2是潛在的G-四鏈體熒光探針。(3)MTT和細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗(yàn)表明,化合物1和2都能抑制HepG2細(xì)胞增殖,...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
        1.2.1 不同G-四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.1 bcl-2G-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.2 c-mycG-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.3 c-kitG-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
            1.2.1.4 端粒G-四鏈體的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
        1.2.2 I-motif四鏈體DNA的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
    1.3 G-四鏈體DNA熒光探針的研究進(jìn)展
    1.4 咔唑衍生物與G-四鏈體DNA相互作用的研究進(jìn)展
    1.5 本論文的設(shè)計(jì)思路和研究?jī)?nèi)容
        1.5.1 設(shè)計(jì)思路
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
第二章 咔唑衍生物的合成及結(jié)構(gòu)表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 咔唑衍生物1和2的合成路線
    2.4 咔唑衍生物1和2的合成及表征
        2.4.1 咔唑衍生物1的合成及表征
        2.4.2 咔唑衍生物2的合成及表征
    2.5 小結(jié)
第三章 咔唑衍生物與不同二級(jí)結(jié)構(gòu)DNA的相互作用
    3.1 引言
    3.2 研究方法
        3.2.1 紫外可見(jiàn)吸收光譜
        3.2.2 等摩爾連續(xù)變化分析
        3.2.3 熒光指示劑TO置換(FID)
        3.2.4 熒光共振能量轉(zhuǎn)移熔點(diǎn)技術(shù)(FRET-melting)
        3.2.5 圓二色譜(CD)
        3.2.6 熒光光譜
        3.2.7 熒光壽命
    3.3 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.4 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        3.4.1 緩沖溶液及化合物儲(chǔ)備液的配置
        3.4.2 DNA的預(yù)處理及緩沖溶液的選擇
        3.4.3 紫外可見(jiàn)吸收
        3.4.4 JobPlot
        3.4.5 FID
        3.4.6 FRET熔點(diǎn)實(shí)驗(yàn)
        3.4.7 CD
        3.4.8 熒光光譜
        3.4.9 熒光壽命
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.5.1 紫外可見(jiàn)吸收
        3.5.2 JobPlot
        3.5.3 FID
        3.5.4 FRET熔點(diǎn)實(shí)驗(yàn)
        3.5.5 CD
        3.5.6 熒光光譜
        3.5.7 熒光壽命
    3.6 小結(jié)
第四章 咔唑衍生物對(duì)HepG2細(xì)胞增殖影響及細(xì)胞成像研究
    4.1 引言
    4.2 研究方法
        4.2.1 MTT實(shí)驗(yàn)
        4.2.2 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 共聚焦成像
        4.2.4 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗(yàn)
    4.3 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
        4.3.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.4 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        4.4.1 溶液的配制
        4.4.2 MTT實(shí)驗(yàn)
        4.4.3 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗(yàn)
        4.4.4 共聚焦成像
        4.4.5 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗(yàn)
    4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.5.1 化合物1和2對(duì)HepG2細(xì)胞活性的影響
        4.5.2 細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗(yàn)
        4.5.3 共聚焦成像
        4.5.4 DNA酶和RNA酶消化實(shí)驗(yàn)
    4.6 小結(jié)
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式



本文編號(hào)：4002347