發(fā)布時間：2025-01-17 16:58

　　研究背景：乳腺癌是源于乳腺導(dǎo)管上皮的惡性腫瘤,近年來其發(fā)病率呈上升的趨勢,已成為發(fā)病率最高的婦科腫瘤�，F(xiàn)已公認(rèn),轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是導(dǎo)致乳腺癌患者死亡的主要原因,因此,明確乳腺癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制、發(fā)現(xiàn)有效的治療靶點(diǎn)是治療乳腺癌的關(guān)鍵。研究目的：應(yīng)用基因芯片技術(shù)和高內(nèi)涵篩選(High Contents Screening, HCS)等較為先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)明確乳腺癌的差異表達(dá)基因,繼而通過體外功能實(shí)驗(yàn)初步探討這些差異基因在乳腺癌演進(jìn)過程中的作用及可能的分子機(jī)制,通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證差異基因蛋白表達(dá),檢測在乳腺癌預(yù)后評估及治療模式風(fēng)險預(yù)測中的臨床應(yīng)用價值,為乳腺癌提供有效的預(yù)后評估新分子標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)。材料與方法：1)應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測20對乳腺癌與正常乳腺組織中的基因表達(dá)譜,初步篩選差異表達(dá)基因,繼而應(yīng)用實(shí)時熒光定量PCR (Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR)和HCS等生物學(xué)技術(shù)明確乳腺癌的差異表達(dá)基因；2)制備慢病毒PAIP1 shRNA質(zhì)粒,沉默MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中的目的基因,繼而應(yīng)用熒光標(biāo)記顯微鏡觀察計數(shù)以及流式細(xì)胞技術(shù)等檢測細(xì)胞增殖、凋亡以及細(xì)...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
ABBREVIATIONS
1. Introduction
2. Materlals and methods
    2.1 Cell culture
    2.2 Total RNA extraction and genechip hybridization
    2.3 Enrichment analysis of DEGs
    2.4 Ingenuity pathway analysis(IPA)
    2.5 HCS analysis
    2.6 Real-time PCR
    2.7 Construction of lentiviral vectors expressing PAIP1 shRNA and transfection
    2.8 IF
    2.9 IHC
    2.10 Evaluation of IHC
    2.11 Apoptosis assay
    2.12     Cell cycle analysis with flow cytometry
    2.13 MTT assay
    2.14 Colony formation assay
    2.15 Western blot
    2.16 Statistical analysis
3. Result
    3,1 PAIPl, WSDL2 and HSDL2 were identified as the effective DEGs in breast capersby genechip microarray and HCS analysis
    3.2 The role of PAIPl in breast cancer progression in vitroPAIPI gene was successfully knocked down in MDA-MB-231 breast cancer cells
    3.3 High expression of PAIPl predicts poor prognosis of breast cancersPAIPl protein was over-expressed in breast cancers
4. Discussion
5. Conclusions
REFERENCES
攻讀博士學(xué)位期間的科研業(yè)績
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：4028295