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miR-19a-3p對人白血病T淋巴細(xì)胞TALL-104凋亡和FoxO1-KLF2-S1P1通路的影響

發(fā)布時間:2025-02-15 10:55
  背景與目的叉頭蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,參與細(xì)胞凋亡、DNA損傷修復(fù)、腫瘤發(fā)生和糖代謝等多種生命過程,FoxO1在細(xì)胞核中與FoxO1-DNA結(jié)合位點(diǎn)相結(jié)合,通過其下游轉(zhuǎn)錄因子KLF2調(diào)節(jié)S1P1、CD62L和CCR7的表達(dá)。Kruppel-樣因子2(Kruppel-like factor2,KLF2)也是一種轉(zhuǎn)錄因子,受FoxO1的調(diào)控。近年來研究發(fā)現(xiàn),鞘胺醇-1-磷酸受體(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1P1)是胸腺發(fā)育成熟T細(xì)胞遷出胸腺的關(guān)鍵分子。有研究報道,在胸腺增生型重癥肌無力(MG)患者胸腺中,出現(xiàn)FoxO1、KLF2和S1P1高水平表達(dá),而且Fox O1-KLF2-S1P1通路的作用已經(jīng)在小鼠體內(nèi)胸腺細(xì)胞分化與遷出中得到驗(yàn)證。另外,FoxO1對下游分子KLF2、S1P1、CD62L、CCR7的調(diào)控作用與其在細(xì)胞內(nèi)的定位及磷酸化狀態(tài)有關(guān),PI3K-Akt信號通路的活化可誘導(dǎo)細(xì)胞核內(nèi)FoxO1的磷酸化,磷酸化的FoxO1,從胞核遷出進(jìn)入胞漿,失去轉(zhuǎn)錄活性。有研究發(fā)現(xiàn)miR...

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略詞對照表
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 TALL-104細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 TALL-104細(xì)胞磷酸化與去磷酸化實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 非編碼RNA芯片的檢測
        2.2.4 miRNA19a-3pmimic轉(zhuǎn)染TALL-104細(xì)胞
        2.2.5 miR-19a-3p對TALL-104細(xì)胞增殖和凋亡的影響
        2.2.6 實(shí)時熒光定量PCR檢測各組細(xì)胞目的基因的表達(dá)水平
        2.2.7 Westernblot檢測目的蛋白的表達(dá)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 磷酸化與去磷酸化處理后TALL-104細(xì)胞中FoxO1、KLF2、S1P1、CD62L、CCR7、CD69等mRNA的表達(dá)變化
    3.2 磷酸化與去磷酸化處理后TALL-104細(xì)胞中FoxO1、pFoxO1、KLF2、S1P1等蛋白的表達(dá)變化
    3.3 MG患者胸腺顯著差異表達(dá)miRNA
    3.4 miR-19a-3pmimic轉(zhuǎn)染后TALL-104細(xì)胞miRNA-19a-3p的表達(dá)
    3.5 miR-19a-3p對TALL-104細(xì)胞增殖及凋亡的作用
        3.5.1 miR-19a-3p對TALL-104細(xì)胞增殖的作用
        3.5.2 miR-19a-3p對TALL-104細(xì)胞凋亡的作用
    3.6 miR-19a-3p對TALL-104細(xì)胞中FoxO1、KLF2、S1P1、STAT3、BCL2、SOCS3等mRNA的表達(dá)的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個人簡歷
致謝



本文編號:4034197

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