發(fā)布時間：2025-06-19 05:43

　　禽腺病毒是一種對家禽危害極大的病原體,其中血清4型禽腺病毒(FAdV-4)主要引起禽的心包積水-包涵體肝炎綜合征。該病發(fā)病快、死亡率高,目前預防該病主要靠滅活苗和弱毒苗,但是這兩種疫苗存在很多的缺點,所以研發(fā)一種安全、高效的新型核酸疫苗對該病的防控很有幫助。本研究對其結構蛋白Hexon和Penton進行了串聯(lián),分別進行了原核表達和真核表達,獲得了Hexon-Penton串聯(lián)蛋白,對其免疫效果進行了初步研究,其結果如下:1.禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串聯(lián)蛋白的原核表達及多抗制備本研究根據(jù)NCBI GenBank中公布的Hexon基因和Penton基因序列設計引物,克隆出Hexon基因和Penton基因并串聯(lián),得到Hexon-Penton(HP)串聯(lián)基因,將HP基因導入表達載體pET32a(+),獲得重組質粒pET32a-HP,將其轉化表達菌株BL21經IPTG誘導表達,得到分子質量約為108kDa的HP原核蛋白,HP原核蛋白純化后免疫BALB/c小鼠制備多抗血清,說明HP原核蛋白具有良好的免疫原性,為進一步建立FAdV-4的血清學檢測方法奠定了基礎。2.禽腺病毒血清4型Hex...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1Hexon、Penton與HP基因的擴增Fig2-1TheamplificationofHP

圖2-1Hexon、Penton與HP基因的擴Fig2-1TheamplificationofHPaker；1：Hexon基因；2：Penton基因：TheHexongene；2：ThePentongenET32a-HP的構建amHI和Xh....

圖2-2重組質粒的鑒定Fig.2-2Identificationoftherecombinantplasmids

圖2-1Hexon、Penton與HP基因的擴增Fig2-1TheamplificationofHPaker；1：Hexon基因；2：Penton基因：TheHexongene；2：ThePentongenET32a-HP的構建amHI和X....

圖2-3HP蛋白的表達與鑒定Fig.2-3TheexpressionandidentificationofHPproteinA：HP原核表達；M：預染蛋白Maker；1：HP蛋白；2：空載體對照

第二章禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串聯(lián)蛋白的原核表達導表達，同時設pET32a空載體對照組，誘導5h后離心收集BS洗滌三次后加入適量PBS重懸菌體，制成蛋白樣品。進E，取出凝膠經過考馬斯亮藍染色和脫色液脫色，結果如圖a處出現(xiàn)目的條帶，而空載....

圖2-4HP蛋白的可溶性分析與純化

圖2-4HP蛋白的可溶性分析與純化Fig.2-4ThesolubilityanalysisandpurificationofHPproteinA：HP蛋白的可溶性分析；M：預染蛋白Maker；1：全菌；2：沉淀；3：上清B：包涵體蛋白純化；M：預染蛋白....

本文編號：4050944