發(fā)布時(shí)間：2025-06-24 04:34

　　綿羊肺炎支原體（Mycoplasma ovipneumoniae，Mo）是引起綿羊和山羊傳染性肺炎的病原,主要危害１～３月齡的羔羊。該病原引起的疾病發(fā)生于世界多個(gè)國(guó)家，是影響?zhàn)B羊業(yè)發(fā)展的主要傳染病之一。免疫預(yù)防是控制動(dòng)物傳染病的有效手段，因此研究有效的綿羊支原體肺炎疫苗是預(yù)防控制本病的有效措施。本論文著眼于近些年發(fā)展起來的多表位疫苗技術(shù)，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室前期研究基礎(chǔ)，通過鑒定綿羊肺炎支原體免疫原性蛋白的T細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位，并對(duì)多個(gè)表位進(jìn)行串聯(lián)表達(dá)和免疫實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行了綿羊支原體肺炎多表位疫苗的初步研究。 本論文首先對(duì)綿羊肺炎支原體的EF-Tu基因進(jìn)行了適當(dāng)優(yōu)化、合成并進(jìn)行了原核表達(dá)，對(duì)獲得的43kD的重組蛋白進(jìn)行了Western-blot檢測(cè)和動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明該蛋白可與Mo GH3-3株全菌高免羊血清之間發(fā)生特異性反應(yīng)，在43-55kD之間出現(xiàn)了特異性的反應(yīng)條帶，并且能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗體，間接ELISA方法檢測(cè)為陽(yáng)性，證明具有較好的免疫原性。然后利用生物信息學(xué)軟件對(duì)EF-Tu和本實(shí)驗(yàn)室之前已經(jīng)驗(yàn)證過具有免疫原性的PDHA蛋白進(jìn)行了抗原表位預(yù)測(cè)，對(duì)合成的表位肽進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，成功選取了...

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1EF-Tu基因的PCR產(chǎn)物（1：PCR產(chǎn)物；2：DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)）

.1EF-Tu基因的PCR產(chǎn)物（1：PCR產(chǎn)物；ig2.1PCRproductsofEF-Tu（1:PCRprod-Tu基因序列的分析果如圖2.2所示。目的片段測(cè)序結(jié)果39.62%。將綿羊肺炎支原體EF-Tu基基酸序列進(jìn)行同源性比對(duì)（圖2.3）....

圖2.2綿羊肺炎支原體EF-Tu基因的原始序列和優(yōu)化序列以及編碼氨基酸（黑體和斜體表示優(yōu)化的核苷酸，第二行表示原始序列，第三行表示它的編碼氨基酸）

9圖2.2綿羊肺炎支原體EF-Tu基因的原始序列和優(yōu)化序列以及編碼氨基酸（黑體和斜體表示優(yōu)化的核苷酸，第二行表示原始序列，第三行表示它的編碼氨基酸）Fig2.2OriginalandoptimizedDNAsequenceofM.ovipneumoniae....

圖2.3綿羊肺炎支原體與其它11種支原體EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比較

圖2.3綿羊肺炎支原體與其它11種支原體EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比較Fig2.3ThehomologicalrelationshipofM.ovipneumoniaewithother11Mycoplasmaspeciesba....

圖2.4pET32-a(+)-EF-Tu的酶切鑒定（1：DL10000DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；2：NcoⅠ和XhoⅠ酶切重組pET32-a(+)-EF-Tu產(chǎn)物）

肺炎支原體與其它11種支原體EF-Tu核苷酸序列和氨基酸序icalrelationshipofM.ovipneumoniaewithother11Mycoplasmanucleotidesequences(A)andaminoacidsequ....

本文編號(hào)：4052495