發(fā)布時間：2025-06-23 23:14

　　隱孢子蟲病是重要的人獸共患原蟲病。轉(zhuǎn)染技術(shù)是指將外源基因?qū)�入真核�?xì)胞內(nèi)，并在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的技術(shù)。運用轉(zhuǎn)染技術(shù)，構(gòu)建隱孢子蟲轉(zhuǎn)染載體，將會為研究隱孢子蟲基因功能，篩選藥物靶基因和保護(hù)性抗原基因提供有效的工具。本研究以貝氏隱孢子蟲為模型，以黃色熒光蛋白為標(biāo)記分子構(gòu)建隱孢子蟲轉(zhuǎn)染載體，并通過限制性內(nèi)切酶介導(dǎo)的整合轉(zhuǎn)染方法在雞體內(nèi)建立隱孢子蟲轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。 首先，120只雛雞分為5組，分別采用直腸接種子孢子，嗉囊接種卵囊，直腸接種卵囊，嗉囊接種子孢子和嗉囊接種PBS液五種接種方法進(jìn)行接種。在接種后檢測各組排卵囊情況，并取法氏囊和氣管等組織制作組織切片和掃描電鏡切片。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，嗉囊接種卵囊和直腸接種子孢子兩個實驗組，相對于嗉囊接種子孢子和直腸接種卵囊組在排卵囊高峰期收集到的卵囊數(shù)量更多，這說明嗉囊接種卵囊和直腸接種子孢子組為本實驗的最佳接種途徑；觀察組織切片和電鏡切片，發(fā)現(xiàn)嗉囊接種卵囊、直腸接種子孢子以及直腸接種卵囊組的法氏囊粘膜層均附著有大量的貝氏隱孢子蟲帶蟲空泡，而僅在嗉囊接種卵囊組的氣管粘膜表面觀察到少量蟲體，感染有卵囊的法氏囊和氣管粘膜層均有不同程度的損傷，這說明不同的接種途徑對貝氏隱孢子蟲...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1隱孢子蟲水源性傳播Table1-1ThewaterbornespreadofCryptosporidium

子孢子為月牙形，殘留體則是由顆粒狀的物質(zhì)和一個空子排列一般不整齊，殘留體顏色為暗黑色或暗棕色；感染人類的主人隱孢子蟲（C.hominis），其卵囊直徑大概為4.6-5.4μm，囊壁厚度，卵囊呈圓形或近圓形；另一個比較重要的隱孢子蟲——安氏隱孢rsoni）主要寄生于反芻動物的....

圖2-1HE染色法以及改良抗酸染色法鏡下觀察C.baileyi

1HE染色法以及改良抗酸染色法鏡下觀察C.baileyi。圖A（×400）和圖D（×100接種子孢子實驗組中法氏囊黏膜層上大量處于各種階段的蟲體；圖B（×400）為直囊組的法氏囊和嗉囊接種卵囊組的法氏囊切片圖（嗉囊接種卵囊組未給出）。圖C（管切片圖之一，沒有觀察到有....

圖2-2掃描電鏡觀察嗉囊和直腸接種卵囊和子孢子法氏囊和氣管粘膜表面C.baileyi

鏡觀察嗉囊和直腸接種卵囊和子孢子法氏囊和氣管粘膜表面C.ba×2000）和D（×2000）分別為直腸接種子孢子，嗉囊接種卵囊以氏囊表面附著著大量內(nèi)生階段C.baileyi帶蟲空泡；圖F（×2000）面附著的少量C.baileyi蟲體；圖E（×2000）顯示為直腸接....

圖2-3B嗉囊接種卵囊組雞血液中C.baileyi的PCR檢測

A直腸接種子孢子組雞血液中C.baileyi的PCR檢測。Lane部分序列為陽性對照；Lane2-11：陰性對照組和接種后12h,h,144h,168hand192h采集的檢測血樣組。2-3APCRexaminationofC.ba....

本文編號：4052140