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腎癌來源的間充質(zhì)干細胞通過激活NF-kB 信號通路誘導巨噬細胞向M2型極化并促進腎癌侵襲與遷移

發(fā)布時間:2025-01-14 16:39
  目的 腎癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,對于腫瘤微環(huán)境而言,巨噬細胞(M0)是重要的組成部分,巨噬細胞由M0型向M2型極化是腫瘤進展的重要因素之一。間充質(zhì)干細胞(MSC)是一種多功能成體干細胞,我們之前的研究發(fā)現(xiàn)進展期腎癌可以通過分泌高水平IL-8,誘導MSC歸巢至腎癌促進腎癌進展,眾所周知,MSC來源廣泛,且取材方便,是理想的細胞治療載體,如果我們能闡明腎癌微環(huán)境內(nèi)MSC調(diào)節(jié)TAMs極化的分子機制,并針對MSC逆轉(zhuǎn)巨噬細胞極化,則有望以MSC為靶點,通過逆轉(zhuǎn)巨噬細胞功能,重塑腎癌微環(huán)境,這對目前腎癌的治療將具有十分重要的意義;該文章的主要研究目的是為了進一步探討腎癌微環(huán)境中MSC對腫瘤相關巨噬細胞的作用以及在此過程中NF-k B信號通路是否具有調(diào)控作用,以及MSC對腎癌侵襲與遷移能力的影響;方法 我們從腎癌組織中分離間充質(zhì)干細胞,鑒定完成以后將該細胞傳至第3代,以便用于后續(xù)實驗;為了研究得到腫瘤相關巨噬細胞,我們用150n MPMA處理THP-1細胞24h,得到M0型TAMs,把M0型巨噬細胞培養(yǎng)在加入10pg/ml LPS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h,得到的細胞為M1型巨噬細胞,然后將M0...

【文章頁數(shù)】:42 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.腎癌來源的間充質(zhì)干細胞A:第一代及第三代腎癌間充質(zhì)干細胞B流式細胞技術檢測腎癌間充質(zhì)干細胞表面CD105、CD73CD34、CD45的表達量

圖1.腎癌來源的間充質(zhì)干細胞A:第一代及第三代腎癌間充質(zhì)干細胞B流式細胞技術檢測腎癌間充質(zhì)干細胞表面CD105、CD73CD34、CD45的表達量

安徽醫(yī)科大學碩士論文203.1腎癌來源的間充質(zhì)干細胞為了后續(xù)實驗研究,我們從腎癌組織中分離提取間充質(zhì)干細胞(RCC-MSC)),并將該細胞傳代至第3代,用于后續(xù)實驗,電子顯微鏡下可以看到間充質(zhì)干細胞形態(tài)呈長梭形,這種形態(tài)和以往報道的間充質(zhì)干細胞形態(tài)相比是一致的(圖1A);我們用流....


圖3.腎癌來源的間充質(zhì)干細胞可以通過激活NF-kB信號通路誘導M0型巨噬細胞向M2型極化,進而促進腎癌進展

圖3.腎癌來源的間充質(zhì)干細胞可以通過激活NF-kB信號通路誘導M0型巨噬細胞向M2型極化,進而促進腎癌進展

安徽醫(yī)科大學碩士論文22我們將M0型巨噬細胞與腎癌來源的間充質(zhì)干細胞共培養(yǎng)2天;WB檢測共培養(yǎng)后巨噬細胞表面標志物變化情況,結(jié)果提示隨著間充質(zhì)干細胞數(shù)量的增加,M0巨噬細胞表面CD206,CD163,ARG-1,NF-kB信號通路特異性蛋白p50,p65表達量逐漸升高,NF-kB....


圖4.:骨髓間充質(zhì)干細胞誘導生成的MSC-1可以誘導M2型細胞向M1型極化A:骨髓來源MSC暴露在含有10pg/mlLPS的培養(yǎng)基中24h細胞形態(tài)未見明顯改變B:M2型巨噬細胞與不同數(shù)量MSC-1細胞進行共培養(yǎng),WB檢測M2型巨噬細胞表面標志

圖4.:骨髓間充質(zhì)干細胞誘導生成的MSC-1可以誘導M2型細胞向M1型極化A:骨髓來源MSC暴露在含有10pg/mlLPS的培養(yǎng)基中24h細胞形態(tài)未見明顯改變B:M2型巨噬細胞與不同數(shù)量MSC-1細胞進行共培養(yǎng),WB檢測M2型巨噬細胞表面標志

安徽醫(yī)科大學碩士論文24圖4.:骨髓間充質(zhì)干細胞誘導生成的MSC-1可以誘導M2型細胞向M1型極化A:骨髓來源MSC暴露在含有10pg/mlLPS的培養(yǎng)基中24h細胞形態(tài)未見明顯改變B:M2型巨噬細胞與不同數(shù)量MSC-1細胞進行共培養(yǎng),WB檢測M2型巨噬細胞表面標志物CD206,....


圖2.差速離心法提取外泌體流程圖

圖2.差速離心法提取外泌體流程圖

安徽醫(yī)科大學碩士論文33表1.外泌體最新數(shù)據(jù)統(tǒng)計1.Numberofexosomestudies2862.Numberofproteinentries418603.Numberofproteins97694.NumberofmRNAentries49465.NumberofmRN....



本文編號:4026894

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