發(fā)布時間：2025-06-25 22:55

　　H9N2亞型禽流感病毒滅活疫苗主要激發(fā)體液免疫應答,臨床上高抗體水平的禽群感染H9N2禽流感病毒發(fā)病的情況時有發(fā)生。研究表明細胞免疫更有利于阻止流感病毒的感染,因此研制高效的H9N2禽流感病毒疫苗變得極為重要。哺乳動物IgG Fc片段可以作為分子佐劑增強與其融合蛋白的細胞免疫應答和體液免疫應答。本研究室前期研究表明雞艾美耳球蟲(Eimeria species)具有作為疫苗活載體的潛能。因此,本論文用融合表達禽IgY Fc或鼠IgG Fc片段和H9N2亞型流感病毒HA1的轉基因艾美耳球蟲為活載體疫苗,以雞和小鼠為動物模型研究Fc片段對球蟲和流感病毒抗原的免疫增強作用。 本研究首先用原核表達的融合蛋白檢測了禽IgY Fc片段對H9N2流感病毒保護性抗原HA/HA1的免疫增強作用。研究發(fā)現(xiàn)融合蛋白HAlchFc降低了免疫組雞群流感病毒的排出,表明禽IgY Fc片段具有類似哺乳動物IgG Fc片段的分子佐劑功能�；�于此研究,我們分別構建了表達雞IgY Fc片段(Emi.chFc, Et.chFc、H9N2流感病毒HA1(Emi.HA1,Et.HA1)、表達雞IgY Fc和HA1的融合蛋白(Em...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1-3哺乳動物IgG和禽類IgY的分子結構(引自Warre/fl/.,Immunologytoday1995)

■0)4區(qū)與哺乳動物IgG的Cy2和Cy3具存同源性；Cu2是IgG的鉸鏈區(qū)，而它在IgY中沒有得到充分進化（圖1-3)。在鴨子中IgY的存在形式勾之不同，是截短耶的IgY(AFc)，不存在Q)3和Cu4區(qū)[44]。Hinge Potentialswitchregions....

圖1-4哺乳動物IgG受體FcRn、禽類IgY受體FcRY和甘露糖受體家族成員的結構示意圖

(IgG)的功能相似，但是結構差別很大。哺乳動物FcRn的結構類似MHC丨類分子，而禽類FcRY的結構勾甘露糖受體家族成員隣脂_A2受體同源性很高（圖1-4）。FcRY是I類膜蛋A，含有1459個氨基酸殘基，由胞外域、跨膜區(qū)域和胞內域組成。FcRY的胞外域足抗....

圖2-3HA/HAI蛋白的原核表達與鑒定Aa.含有i毎切位點的HA基因彳廣増：Ab.HA基因連接F"et28a載體后的PCR鑒定圖；Ac.重組質粒Pet28aHA的酶切鑒定圖

圖2-3HA/HAI蛋白的原核表達與鑒定位點的HA基因彳廣増：Ab.HA基因連接F"et28a載體后的PCR鑒定圖；Ac.重組質粒Pet28aHA。Ba.Pet28aHA蛋白的小量誘導SDS-PAGE電泳圖：I,未誘導菌體：2,ImMIPTG誘導2h;G誘導4h:4....

圖2-4HA/HAl和禽IgYFc片段的融合蛋白的原核表達與鑒定Aa.以序列合成后的pGSUlAchFc質粒為模板『增HachFc基因；Ab.基因HAcliFc連接Pet2丨a載體后的PCR鑒18

IIAI蛋白western鑒定圖。I,稀釋后的pet28丨丨Al蛋白樣品：2,未誘導囷體sladder,分子量大�。╞p)分別為5000.2000.1000.750.500.250.100.Fig.2-3ProkaryoticexpressionofHA/H....

本文編號：4052746